本发明涉及生物工程技术领域,尤其是一种对PRRSV具有特异性免疫刺激作用的CpG‑ODN及其应用,核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示:以筛选出来的11个CpG‑ODN片段随机组成10组免疫激活单元,且每组免疫激活单元中各个CpG‑ODN片段位置信息不相同,将10组免疫激活单元通过XbaI和EcoRI两个酶切位点插入多拷贝克隆载体Puc19衍生载体FVX中,以基因合成的手段构建重组质粒FVX‑CpG,制备含有重组质粒FVX‑CpG的制剂,该制剂生产成本低,克服了在体内CpG‑ODN的不稳定性、序列多样性和个体差异等缺陷;不仅能诱导猪体内天然免疫功能激活,还能激活猪体内对PRRSV的获得性免疫功能,提高猪体内对PRRSV的免疫反应诱发作用,降低PRRSV发病率,降低猪养殖成本。
本发明涉及生物工程技术领域,尤其是一种对PRRSV具有特异性免疫刺激作用的CpG‑ODN及其应用,核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。通过以筛选出11个CpG‑ODN片段,将筛选出的11个CpG‑ODN片段首尾相连形成含有许多以‑CG‑二核苷酸为一个CpG基元的DNA序列,命名为“Multi‑CpG”。将以‑GTCGTT‑作为一个CpG基元的DNA序列:TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT替换上述“Multi‑CpG”中长度相同的一段DNA序列,命名为“Multi‑CpG‑Mix”。将多个“Multi‑CpG‑Mix”首尾连接成为一个CpG基元的DNA序列,再将该CpG基元的DNA序列通过XbaI和EcoRI两个酶切位点插入多拷贝克隆载体Puc19衍生载体FVX中,以基因合成的手段分别构建含有许多个“Multi‑CpG‑Mix”的重组质粒FVX‑CpG,再经试验筛选所得,不仅能诱导猪体内天然免疫功能激活,还能激活猪体内对PRRSV的获得性免疫功能。