本发明公开了一种山羊支原体山羊肺炎亚种特异性蛋白87.1及间接ELISA试剂盒,所述蛋白87.1具有如SEQ ID NO.1所示的核酸序列,所述山羊支原体山羊肺炎亚种特异性蛋白87.1制备的间接ELISA抗体检测试剂盒包括抗原蛋白87.1包被的酶标板、样品稀释液、阳性血清、阴性血清、洗涤液、封闭液、兔抗羊二抗、底物显色液、终止液。抗原蛋白87.1的包被量为625ng/孔,阳性血清和阴性血清的稀释度均为1/100。本发明提供的Mccp特异性蛋白87.1制备的间接ELISA试剂盒具有良好特异性,与Mccp阳性血清反应,且不与Mmc、Mcc阳性血清反应。
本发明公开了一种牛支原体的iiPCR检测方法及检测试剂盒。本发明通过以牛支原体的P80基因序列为模板,从P80基因克隆出包含R1序列的M.b序列,以该R1序列为目标设计探针M.b‑specific‑Probe;其中,所述M.b序列如SEQ ID NO:1所示。相应的,本发明的检测试剂盒,其成分除了商品化的Premix Ex Taq外,主要包括特别设计的牛支原体特异性的引物、探针及配套试剂:M.b‑specific‑Forward,M.b‑specific‑Reverse,M.b‑specific‑Probe,Nuclease‑free water,阳性对照模板。本发明除了用于实验室常规检测牛支原体核酸外,特别适用于无实验室条件下(如基层兽医部门、养殖场等)的现场检测,具有高特异性和灵敏性,是一种快速、准确的牛支原体核酸检测试剂盒,具有良好的应用前景。
本发明公开了一种用于检测山羊支原体山羊肺炎亚种的特异性PCR引物,本发明首先通过对山羊支原体山羊肺炎亚种基因测序和对比,筛选到用于检测山羊支原体山羊肺炎亚种的靶序列,其基因序列如SEQ ID NO.1所示,然后设计了检测其的特异性PCR引物,可将Mccp与丝状支原体簇其他成员以及常见反刍动物支原体区分开,显示出良好的特异性,可作为新诊断靶标,以此为基础建立更具临床实用性的Mccp诊断技术。