本发明涉及医疗技术领域,公开了融合魏斯氏菌(Weissella confusa)J4‑1胞外多糖抗结直肠癌的应用,融合魏斯氏菌(Weissella confusa)J4‑1的保藏编号为CCTCC M 20221189。本发明通过设置实验动物及分组,构建裸鼠皮下瘤模型,对实验分组进行处理,制作病理标本,小鼠肿瘤组织及心肝脾肺肾组织病理学检查,细胞实验分组及处理,检测结肠癌细胞增殖情况,细胞周期检测,J4‑1胞外多糖抗结肠癌细胞增殖机制验证和实验结果十个步骤,通过采用瘤内注射J4‑1胞外多糖,能明显抑制结肠癌细胞的G0/G1期细胞周期进展,抑制细胞增殖,有效的发挥抗结肠癌作用。同时兼有对小鼠体重和生长状态无影响、对小鼠重要脏器无损伤的安全性。
本发明涉及结肠癌治疗技术领域,且公开了食窦魏斯氏菌(Weissellacibaria)D‑2胞外多糖在抑制人结肠癌细胞中的应用。本发明从健康婴幼儿粪便中筛选出一株食窦魏斯氏菌(保藏编号:CCTCC M 20221190),该菌株的胞外多糖通过Fas/Fasl‑Caspase8‑Caspase3通路,促进结肠癌细胞的细胞凋亡进程,为食窦魏斯氏菌胞外多糖的抗肿瘤作用提供了有力的证据。将食窦魏斯氏菌D‑2胞外多糖作用于人结肠癌细胞,发现该食窦魏斯氏菌D‑2胞外多糖通过促细胞凋亡的方式有效的发挥抗结肠癌作用,食窦魏斯氏菌D‑2胞外多糖是存在于哺乳动物肠道中共生微生物的细胞成分,从临床应用的角度来看,与其他抗肿瘤药物相比,更为安全。
本发明涉及条件性敲除lncRNA DLX6‑os1转基因小鼠的培育方法,有效解决作为动物模型,适用于不同组织器官中研究该lncRNA的作用问题,构建Dlx6‑os1条件敲除载体,Dlx6‑os1基因,转录物:Dlx6‑os1‑201 ENSMUST00000159568.5,位于小鼠6号染色体上的三个外显子,以三个外显子作为条件敲除区域;将C57BL/6小鼠基因文库中RP24‑276P7 and RP24‑260F14的BAC克隆作为模板,进行PCR;在目的载体中,Neo位点旁插入自删除锚定位点,基因敲除区域旁插入loxP位点,DTA阴性选择;与Cre酶介导的基因重组,得基因敲除质粒载体;将基因敲除质粒载体导入ES细胞中,与多种不同器官带有Cre酶的转基因小鼠杂交,得到在不同器官中降低DLX6‑os1表达水平的阳性小鼠。本发明适用于在不同组织器官中研究该lncRNA的作用,开拓了对糖尿病诊断治疗的新途径。