本发明公开了ZmECT2蛋白及其编码基因在调控玉米籽粒品质中的应用。本发明提供了ZmECT2蛋白或其相关生物材料(表达ZmECT2蛋白的核酸分子或含所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系)的下述应用；调控植物质粒品质、调控植物籽粒蛋白含量和/或淀粉含量；所述ZmECT2蛋白为SEQ ID No.1或将其经过一个或几个氨基酸的取代、缺失和/或添加或与其相比具80％以上同一性且源于水稻具相同功能的蛋白或在其N端和/或C端连接标签后所得融合蛋白。本发明ZmECT2可以调控植物籽粒品质，包括调控籽粒蛋白含量和淀粉含量。本发明对于通过遗传育种和基因工程方法利用该基因资源有效地调控植物籽粒品质具有重要的应用价值。
本发明公开了葡萄糖淀粉酶GA51及其突变体和应用。本发明首先公开了葡萄糖淀粉酶GA51，其氨基酸序列为SEQ ID No.1所示。本发明进一步将葡萄糖淀粉酶GA51进行突变获得催化效率显著提升的突变体；具体的，将氨基酸序列为SEQ ID No.1所示的葡萄糖淀粉酶GA51分别进行A304S、G590S、A557S、L576T、I397V、N207A、A606S、D563N或D571S单位点突变获得了9个单位点突变体。酶活测定结果显示所有突变体的相对酶比活基本均为野生型的2倍以上，其中A557S相对酶比活最高，为葡萄糖淀粉酶GA51的2.88±0.03倍，突变体A557S的催化效率约为葡萄糖淀粉酶GA51的4.13倍。
本发明公开了漆酶突变体及其应用。本发明将氨基酸序列为SEQ ID No.1所示的野生型漆酶13B22分别进行D511E、V435I、I88L、H436E、G430S、V378I、I424F、N367D、I129L、W502F、H439Y或S248A单位点突变获得了12个单位点突变体，所得到的突变体酶活较野生型漆酶有不同提升，其中，突变体D511E较野生型漆酶的最适温度以及酶活有明显提升并且对于有毒化合物的降解效果有显著改善。本发明进一步提供了突变体的编码基因，含有所述突变体的编码基因的重组表达载体、宿主细胞以及制备重组漆酶突变体的方法。本发明所提供的漆酶突变体降解毒性化合物中具有应用前景。
本发明公开了蒺藜苜蓿MtMET1基因在调控植物耐逆境胁迫中的应用。本发明以蒺藜苜蓿为实验材料，从中克隆了蒺藜苜蓿DNA甲基转移酶基因，该基因的CDS的核苷酸序列为SEQ ID No.1所示。本发明利用生物信息学工具分析该基因的结构特征并进一步通过转化拟南芥初步分析其基因功能，结果发现，在拟南芥中过表达MtMET1基因的转基因植株较野生型拟南芥植株抗逆性更差，证明蒺藜苜蓿MtMET1基因具有调控植物耐逆境胁迫的功能。
本发明公开了大丽轮枝菌VdNRPS4基因抗病原菌靶基因片段及干扰载体和应用。本发明以大丽轮枝菌VdNRPS4作为靶标基因，通过VIGS技术研究其与病原菌致病力之间的关系并利用转基因和RNAi技术相结合获得能够显著提高植物抗大丽轮枝菌的靶基因片段，其核苷酸序列分别为SEQ ID No.1、SEQ ID No.2或SEQ ID No.5所示。本发明进一步提供了采用所述靶基因片段构建的干扰载体。本发明提供的大丽轮枝菌VdNRPS4基因抗病原菌靶基因片段以及采用该靶基因片段构建的干扰载体能应用于提高作物对大丽轮枝菌所导致病害的抗性以及培育抗大丽轮枝菌的转基因植物新品种等方面。
本发明公开了大丽轮枝菌VdNRPS6基因抗病原菌靶基因片段及其干扰载体和应用。本发明以大丽轮枝菌的VdNRPS6作为靶标基因，通过VIGS技术研究其与病原菌致病力之间的关系，并利用转基因和RNAi技术相结合筛选获得能够显著提高植物抗性的靶基因片段，其核苷酸序列分别为SEQ ID No.1、SEQ ID No.3或SEQ ID No.5所示。本发明进一步提供了采用所述靶基因片段构建的RNA干扰载体及其应用。本发明提供的大丽轮枝菌VdNRPS6基因抗病原菌靶基因片段以及采用所述靶基因片段构建的RNA干扰载体能应用于提高作物对大丽轮枝菌所导致病害的抗性以及培育抗大丽轮枝菌的转基因棉花新品种等方面。
本发明公开了一种转基因玉米BBL2‑2转化体特异性定量PCR检测引物、检测方法。特异性引物对为：BBL2‑2‑qF，其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1所示；BBL2‑2‑qR，其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.2所示。特异性探针为：BBL2‑2‑P，其序列如序列表SEQ ID No.3。采用本发明的引物对与探针进行实时荧光定量PCR反应，可以鉴定样品中是否含有转基因玉米BBL2‑2品系，并能对其含量进行准确定量。
本发明公开了一种控制叶片颜色的融合蛋白，该融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；本发明还公开了用于鉴定转录因子与启动子DNA之间互作关系的报告系统，包括表达盒A和表达盒B；其中表达盒A包括植物强表达启动子、MCS1和终止子；表达盒B包括Ω增强子、MCS2、SGRED基因和终止子。利用本发明控制叶片颜色的融合蛋白和报告系统鉴定转录因子和启动子DNA之间的互作关系，结果准确、可靠，并且可以在可见光下裸眼直观、实时判断；本发明方法简单，成本低；且可在植株内部进行，不受外界干扰，还避免了假阳性问题，为植物转录因子和启动子DNA之间互作分析提供了一个高效的工具。
本发明公开了一种控制水稻叶片结构的方法及应用。本发明属于生物技术领域，具体涉及一种控制水稻叶片结构的方法及应用。本发明提供一种调控植物叶片结构的方法，包括调控目的植物中蛋白质的活性和/或含量，或/和调控蛋白质的编码基因的表达量，来调控植物叶片结构，蛋白质是如下的蛋白质：由氨基酸序列是SEQ ID No.3的蛋白质OsSHR1和氨基酸序列是SEQ ID No.4的蛋白质OsSHR2组成的组合物。实验证明，降低两个同源基因OsSHR1和OsSHR2的表达可以调控水稻叶片结构，控制水稻叶片叶脉数量和叶脉密度增加，对水稻育种具有重要的理论意义。
本发明公开了具有溶菌活性的几丁质酶及其突变体和应用。本发明首先提供了具有溶菌活性的几丁质酶，其氨基酸序列为SEQ ID No.1所示。本发明进一步对几丁质酶进行Q8K、C28K、V121R、Q124E、D136E、N209R或K218R中的任何一种氨基酸单位点突变获得单位点突变体以及进行C28K/D136E双位点突变获得双位点突变体。本发明所提供的几丁质酶或各突变体具有较高的溶菌酶活性，可用于溶解或破坏细菌的细菌壁，实现杀菌或抑菌的效果，在杀灭有害细菌、食品防腐等方面具有应用前景。
本发明提供了一种使用dotP基因提高生物抗逆性的方法，该方法包括：将dotP基因转入宿主生物中，并且使得宿主生物中表达所述dotP基因；所述宿主生物为植物或微生物；所述dotP基因编码如下蛋白(a)或(b)：(a)由SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列组成的蛋白；(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加n个氨基酸且具有四肽重复序列蛋白活性的由(a)衍生的蛋白，其中，n为1～4之间的任意一个整数。通过上述技术方案，本发明提高了植物或微生物的生物抗逆性，特别是提高了植物或微生物的干燥抗性。
本发明提供了一种使用csiP基因提高生物抗逆性的方法，该方法包括：将csiP基因转入作物中，并且使得宿主生物中表达所述csiP基因；所述csiP基因编码如下蛋白(a)或(b)：(a)由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白；(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加n个氨基酸且具有冷激蛋白结构域的由(a)衍生的蛋白，其中，n为1～4之间的任意一个整数。通过上述技术方案，本发明提高了作物的抗干旱胁迫能力，例如显著提高了油菜的抗旱能力。
