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[发明专利]一种小鼠腔前卵泡三维培养体系及其建立方法-CN202011415326.2在审
发明人：范海瑞;包文斌;吴圣龙;吴正常;王海飞 -专利权人：扬州大学
申请日： 2020-12-07 - 公布日： 2021-06-04 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明公开了一种小鼠腔前卵泡三维培养体系及其建立方法，提供了一种用于体外培养小鼠腔前卵泡的试剂组合，该试剂组合包含：藻酸盐溶液、CaCl2凝胶液、卵泡分离液(DM)、卵泡平衡液(MM)、卵泡酶解液(EM)、卵泡生长液(GM)、卵泡成熟液(MM1)和透明质酸酶。采用该试剂组合建立了一种小鼠腔前卵泡三维培养体系，该三维培养体系以藻酸盐凝胶为基质，以藻酸盐与Ca2+形成的凝胶滴为卵泡发育提供立体结构，再通过在不同的培养基质中进行培养，得到发育成熟的卵泡，进一步得到成熟的卵母细胞。
一种小鼠卵泡三维培养体系及其建立方法

[发明专利]卵泡液抽吸-CN201980088721.3在审
发明人：斯拉文·古玛·帕耶利;帕瓦尼·斯利维迪亚·莫查拉 -专利权人：斯拉文·古玛·帕耶利
申请日： 2019-07-02 - 公布日： 2021-08-20 - 主分类号： A61B17/435 文献下载
摘要：本主题公开了抽吸卵泡液的装置和系统。在一个实例中，用于抽吸卵泡液的卵拾取(OPU)装置包括具有第一末端和与第一末端相对的第二末端的针。针的第一末端用以刺穿卵巢卵泡以通过吸取力从卵巢卵泡抽吸卵泡液。弹性管是可压缩的，同时定位卵巢卵泡并将针刺穿卵巢卵泡，以在抽吸两个卵泡之间的卵泡液期间调节吸取力。
卵泡抽吸

[发明专利]卵泡内容物存储-CN201980030141.9在审
发明人：贝扎莱尔·克纳尼;阿姆农·威奇思班 -专利权人：卡梅尔诊断有限公司
申请日： 2019-03-26 - 公布日： 2020-12-11 - 主分类号： A61B10/02 文献下载
摘要：一种单离及储存卵泡内容物的方法，包含：在一单个卵母细胞取回过程中，从一女性主体的多个卵泡重复收集卵泡内容物，所述卵泡内容物包含一卵母细胞和卵泡液(FF)；以及将其余被收集的所述卵泡内容物中源自相同卵泡的每个卵母细胞和卵泡液储存在一分离存放格中
卵泡内容存储

[实用新型]一种辅助取卵设备-CN202023129793.7有效
发明人：邢俊 -专利权人：南京鼓楼医院
申请日： 2020-12-23 - 公布日： 2021-11-23 - 主分类号： A61B17/425 文献下载
摘要：本实用新型提供一种辅助取卵设备，包括：卵泡液提取装置、卵泡液输送装置及卵母细胞拾取装置；卵泡液提取装置包括：取卵液储存箱、取卵针、抽吸泵、蠕动泵、T型接头及保温管；卵泡液输送装置包括：输送滑道、加热板、本实用新型利用卵泡液提取装置可以辅助医生一个人完成卵泡液的抽取和注入，并且利用卵泡液输送装置替代人工及时的将保温管运输至卵母细胞拾取装置内，整体结构传递稳定、易操作、效率高，保证操作的精确性；大大提升便利性；本实用新型的卵泡液输送装置可以依据实际的现场环境设计长度和角度，而且可以保证传递过程温度的恒定。
一种辅助设备

[发明专利]一种蛋鸭小卵泡膜细胞的分离提取方法-CN201810324356.9有效
发明人：罗茜;陈伟 -专利权人：广东省农业科学院动物科学研究所
申请日： 2018-04-11 - 公布日： 2021-07-16 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种蛋鸭小卵泡膜细胞的分离提取方法，包括以下步骤：选取一只产蛋期蛋鸭，解剖剪取卵巢组织，分离出卵泡；剥离小卵泡外的结缔组织层，固定住卵泡后将小卵泡剪破，将卵泡膜翻转，卵泡膜内层朝上，刮除卵黄和颗粒细胞层；在卵泡膜层中加入Ⅱ型胶原蛋白酶消化液，进行消化处理；再次刮除上述的组织内外两面细胞，吹打、冲洗组织层；将冲洗干净的组织层置于新配置的Ⅱ型胶原蛋白酶消化液中，进行消化处理；将组织剪成碎片，进行消化处理；将混悬液用细胞网筛过滤，收集滤液，加入胎牛血清终止消化，离心收集细胞沉淀，制备得到蛋鸭小卵泡膜细胞。
一种蛋鸭卵泡细胞分离提取方法

[发明专利]水牛卵泡液多肽组的制备和质谱分析方法-CN201310595339.6有效
发明人：张明;付强;黄愉淋;黄德伦 -专利权人：广西大学
申请日： 2013-11-21 - 公布日： 2017-03-22 - 主分类号： G01N1/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种水牛卵泡液多肽组的制备和质谱分析方法，先通过合理浓度的乙腈沉淀水牛卵泡液中的高丰度蛋白质，可有效去除高丰度蛋白质对检测的干扰，再通过不同孔径的超滤管多次过滤、截留不同分子量的多肽，能有效富集多肽组样品；脱盐处理后，用飞行时间质谱仪分析多肽组指纹图谱，在质谱检测时，通过合适的质谱分析条件，能高通量鉴定卵泡液多肽组信息。本发明精确、高效、费用低，实现了对水牛卵泡液中多肽组的高效制备和质谱检测，其检测结果可用于分析成熟卵泡液和未成熟卵泡液中多肽组组分鉴定和差异分析，发明人据此发现了一批与卵母细胞成熟微环境卵泡液的生物标志物
水牛卵泡多肽制备谱分析方法

[发明专利]一种卵母细胞培养液及提高卵母细胞质量的体外培养方法-CN201911231323.0有效
发明人：蔡更元;吴珍芳;李紫聪;招华兴;张宁;郑恩琴;顾婷;杨化强;洪林君;杨杰 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2019-12-05 - 公布日： 2022-11-04 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明提供了一种卵母细胞培养液，该培养液中含有成熟的卵泡液。成熟的卵泡液相对于未成熟的卵泡液，成熟的卵泡液对卵母细胞体外成熟有积极作用的物质丰度更高，离成熟期越近的卵泡，它的卵泡液越能促进卵母细胞IVM，并改善其质量。使用体内成熟卵泡液作为卵母细胞体外成熟培养液的组分能有效提高卵母细胞的质量，并且能降低卵母细胞中的ROS含量。由此。
一种细胞培养液提高质量体外培养方法

[发明专利]一种小体鲟卵泡膜细胞系的体外构建方法及其所用试剂-CN201910485993.9有效
发明人：孙爱;胡红霞;朱华 -专利权人：北京市水产科学研究所（国家淡水渔业工程技术研究中心）
申请日： 2019-06-05 - 公布日： 2021-05-11 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明公开了一种小体鲟卵泡膜细胞系的体外构建方法及其所用试剂。该方法包括：1)用消化液消化小体鲟卵巢组织，得到小体鲟卵巢组织细胞悬液；2)静置‑离心法收获小体鲟卵泡膜细胞：将小体鲟卵巢组织细胞悬液进行静置，收集含有细胞及细胞团的上清液；将上清液进行离心，收集沉淀，向沉淀中加入培养液，制成细胞悬液接种培养，得到小体鲟卵泡膜细胞；3)二次消化进行传代培养：待小体鲟卵泡膜细胞长成单层后，用消化液进行两次消化后传代培养得到小体鲟卵泡膜细胞系。本发明利用静置‑离心法和二次消化法建立了小体鲟卵泡膜细胞系，建立的细胞系可以连续传代，经过这种方法所获得的细胞可传60代以上，能在体外提供大量的卵泡膜细胞。
一种小体卵泡细胞系体外构建方法及其所用试剂

[发明专利]一种体外培养人次级卵泡的培养液及其应用-CN202211330660.7在审
发明人：郭映纯;方丛;梁晓燕 -专利权人：中山大学附属第六医院
申请日： 2022-10-26 - 公布日： 2022-12-30 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明涉及细胞培养技术领域，尤其是涉及一种体外培养人次级卵泡的培养液及其应用。所述体外培养人次级卵泡的培养液含有以下浓度的组分：胎球蛋白0.5～2mg/mL、胰岛素‑转铁蛋白‑硒混合液0.1～1％、血清蛋白替代物5～10％、人神经营养因子4 10～200ng/mL和人重组卵泡刺激素本发明的体外培养人次级卵泡的培养液可提高人次级卵泡体外培养获得的窦卵泡直径及体积，提高其发育水平；还可以提高人次级卵泡体外培养获得卵母细胞的体外成熟率，应用于临床后有望为患者保存更多成熟卵母细胞。
一种体外培养人次卵泡培养液及其应用

[发明专利]一种人造卵巢及其制备和应用-CN201611130345.4在审
发明人：张键;阮长顺;任培根;杨雅莉;孙立峰;翟欣昀;吴明明 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2016-12-09 - 公布日： 2018-10-02 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明涉及一种人造卵巢及其制备和应用，具体地，公开了一种人造卵巢，其包括生物相容性支架、卵泡细胞以及包被混合液，其中，包被混合液包裹于卵泡细胞外部，并嵌合于生物相容性支架的空隙内部，本发明的包被混合液由包被辅料和生物激素制成本发明的人造卵巢适用于针对任何物种的原始卵泡、腔前卵泡、有腔卵泡整体或部分组成细胞研究的研究工具，也适用于针对原始卵泡、腔前卵泡、有腔卵泡相关因子、药物前体等的筛选模型，也适用于任何因素引起的卵巢受损的直接相关疾病或间接相关疾病的预防或治疗工具
卵巢包被生物相容性支架混合液制备和应用卵泡细胞腔前卵泡原始卵泡卵泡筛选模型生物激素细胞研究研究工具药物前体直接相关疾病嵌合打印物种受损外部预防治疗

[发明专利]基于卵泡液蛋白表达作为不明原因复发性流产的预警方法-CN202111098867.1在审
发明人：孙小荷;张银丽;童晓嵋;张松英 -专利权人：浙江大学
申请日： 2021-09-18 - 公布日： 2021-12-14 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：技术方案是：本发明提供的技术方案是：一种基于卵泡液HRG、C4B蛋白表达水平作为不明原因复发性流产的预警方法，所述方法非用于疾病诊断治疗；包括如下步骤：1)卵泡液的收集、保存：对收集到的卵泡液在恒温下进行卵冠丘复合物的拾取后将剩余的卵泡液收集，进行1500rpm离心取上清、分装，冻存于‑80℃；2)C4B、HRG卵泡液蛋白浓度ELISA测定：采用相应蛋白的ELISA检测试剂盒，对卵泡液进行相应蛋白浓度的检测；3)结果统计及分析。
基于卵泡蛋白表达作为不明原因复发流产预警方法

[发明专利]一种提高细胞成活率的鸡小黄卵泡膜细胞的体外培养方法-CN202110755938.4在审
发明人：李春苗;赵振华;贾雪波;黄华云;王钱保;黄正洋;黎寿丰;吴兆林;屠云洁;沈海玉;薛龙岗 -专利权人：江苏省家禽科学研究所
申请日： 2021-07-05 - 公布日： 2021-10-08 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明公开一种提高细胞成活率的鸡小黄卵泡膜细胞的体外培养方法，涉及生物工程技术领域；所述方法具体为：将鸡小黄卵泡的膜层与胶原酶混合进行消化，消化后过滤得到细胞悬液；将获得的细胞悬液离心，获得的沉淀即为鸡小黄卵泡膜细胞；将获得的鸡小黄卵泡膜细胞与细胞培养液混合培养，得到鸡小黄卵泡膜细胞系；利用本发明所述的体外培养方法可以在较短的时间内获得大量的鸡小黄卵泡膜细胞，成活率较高，达到95％以上，保证了鸡小黄卵泡膜细胞后续试验的顺利进行
一种提高细胞成活率鸡小黄卵泡体外培养方法

[发明专利]卵泡液外泌体的制备方法及卵泡液外泌体特异miRNA和应用-CN202310150109.2在审
发明人：相文佩;张玲;肖先金;刘宇;蔡斯滢 -专利权人：华中科技大学
申请日： 2023-02-22 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本申请公开了一种卵泡液外泌体的制备方法及卵泡液外泌体特异miRNA和应用，涉及外泌体技术领域。其中，卵泡液外泌体的制备方法包括如下步骤：取清洗干净后的卵巢组织上的卵泡，过滤去除卵泡内的卵母细胞和卵巢组织；离心，留取上清溶液，用过滤器过滤；利用试剂盒提取上清溶液中的卵泡液外泌体，用PBS重悬沉淀，利用年轻小鼠卵泡液来源的外泌体与高龄小鼠颗粒细胞共培养，显著提高了高龄小鼠卵巢颗粒细胞的增殖能力、线粒体功能、激素分泌功能，降低凋亡水平等一系列生物学功能，同时，降低了高龄小鼠卵母细胞异常率和卵巢内氧化损伤水平
卵泡液外泌体制备方法特异 mirna 应用

[发明专利]一种牦牛卵泡液外泌体的提取方法及其应用-CN202310321391.6在审
发明人：潘阳阳;许瑞华;王靖雷;余四九;崔燕;刘斌;王萌;王立斌 -专利权人：甘肃农业大学
申请日： 2023-03-29 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种牦牛卵泡液外泌体的提取方法及其应用，属于外泌体技术领域。该提取方法将收集的牦牛卵泡液，第一次离心后取上清液一；将上清液一第二次离心取上清液二，之后经第一次超速离心得沉淀一，将沉淀一重悬后第二次超速离心得沉淀二，之后重悬、过滤，获得所述牦牛卵泡液外泌体。本发明提供了一种简单且对技术要求不高的卵泡液外泌体提取方法，并经实验证实该提取方法成功分离牦牛卵泡液外泌体，且得到的外泌体能够提高牦牛卵母细胞成熟率，增强卵子发育潜能，为牦牛的辅助繁殖提供新思路。
一种牦牛卵泡液外泌体提取方法及其应用

[发明专利]基于液相芯片技术判断体液环境中细胞状态的方法-CN201310710571.X有效
发明人：叶英辉;黄荷凤;周承亮;曲凡 -专利权人：浙江大学
申请日： 2013-12-20 - 公布日： 2014-04-09 - 主分类号： G01N33/543 文献下载
摘要：本发明提供一种基于液相芯片技术判断体液环境中细胞状态的方法，利用液相芯片技术对卵泡液的生物标志物进行分析，以此判断与卵泡液来自同一卵泡的卵子形成胚胎的质量，与形态学分析相结合，从而决定将优质胚胎选择。卵泡液判断卵子质量的多个因子组合可以制成商品化的液相芯片试剂盒，用于辅助生殖技术。
基于芯片技术判断体液环境细胞状态方法

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