[发明专利]一种测定格列吡嗪原料药及其缓释片中特定基因毒性杂质的分析方法

摘要

本发明公开了一种测定格列吡嗪原料药及其缓释片中特定基因毒性杂质的分析方法，包括以下步骤：首先称取待测物粉末至一量瓶中，接着加入甲醇，超声充分提取，最后取出并放冷，定容置刻度并摇匀，高速离心后取上清液作为供试品分析；采用高效液相色谱‑串联质谱法分析供试品，启动色谱采集计算机系统采集数据；取特定基因毒性杂质对照品，加入甲醇溶解配成对照品溶液，同时进行高效液相色谱‑串联质谱分析，然后计算待测样品中该特定基因毒性杂质的含量。本发明具有专属性强，分析快速，抗干扰性强，灵敏度高的优点。

主权项

1.一种测定格列吡嗪原料药及其缓释片中特定基因毒性杂质的分析方法，其特征在于：包括以下步骤：A、称取格列吡嗪原料药20mg，置20mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1mg/mL的供试品溶液；B、称取相当于20mg格列吡嗪的格列吡嗪缓释片粉末，置20mL量瓶中，用甲醇溶解，超声，放冷，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1mg/mL的供试品溶液，高速离心后，取上清液作为供试品分析；C、称取氨基甲酸乙酯杂质1.5mg，置200mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为7.5μg/mL的对照品储备液；精密量取2mL，置200mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，配成浓度为75 ng/mL的对照品溶液；D、采用高效液相色谱‑串联质谱法分析供试品，同时启动色谱采集计算机系统采集数据；使用外标法计算该特定基因毒性杂质的含量；高效液相色谱‑串联质谱分析方法：对于原料药检测, 色谱条件包括：流动相：pH 3.5醋酸水溶液：乙腈=30：70v/v；色谱柱：十八烷基键合硅胶色谱柱, 内径4.6mm，柱长150 mm, 填料粒径5 μm；流速：0.4‑0.6 mL/min；进样体积：30 μL；柱温：32‑38°C；运行时间：10 min；质谱条件包括：气动辅助电喷雾离子源，正离子，多反应离子监测，MRM，393→347；碎裂电压：120 V，碰撞能量：10 V；干燥气流量：9‑10 L / min，干燥气温度：350°C，雾化室压力：45 Psi，毛细管电压：4000 V；对于片剂检测, 色谱条件包括：流动相A：pH 3.5醋酸水溶液：乙腈=75：25(v/v), 流动相B：pH 3.5醋酸水溶液：乙腈=50：50(v/v)；梯度洗脱程序:时间(min)流动相A(%)流动相B(%)06040106040150100200100216040256040色谱柱：十八烷基键合硅胶色谱柱, 内径4.6mm，柱长150 mm, 填料粒径5 μm；流速：0.4‑0.6 mL/min；进样体积：20 μL；柱温：32‑38°C；运行时间：25 min；质谱条件包括：气动辅助电喷雾离子源，正离子，多反应离子监测，MRM，393→347；碎裂电压：120 V，碰撞能量：10 V；干燥气流量：9‑10 L / min，干燥气温度：350°C，雾化室压力：45 Psi，毛细管电压：4000 V。