[发明专利]一种尿液小细胞外囊泡的改良提取方法有效
申请号: | 201910221861.5 | 申请日: | 2019-03-22 |
公开(公告)号: | CN109929795B | 公开(公告)日: | 2022-08-19 |
发明(设计)人: | 王小中;陈青根;黄波;刘静;邹叶青 | 申请(专利权)人: | 南昌大学第二附属医院 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 330006*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | 本发明公开了一种尿液小细胞外囊泡的改良提取方法,按照如下方法进行密度梯度离心:将不同浓度梯度的蔗糖溶液按照浓度从低至高的顺序依次垫加入试管底部,形成自上而下浓度依次增加的梯度液,在梯度液最上层缓慢加注粗囊泡重悬液,离心;其中所述蔗糖溶液是pH8.4~8.8的20mm Tris‑HCL蔗糖重水溶液,所述粗囊泡重悬液是将粗囊泡重悬于pH8.4~8.8的20mm Tris‑HCL水溶液中制得,该方法能显著提高提取产量,减少样本用量,并能大幅缩短提取耗时,与差速离心和超滤法结合能显著提高提取纯度,临床使用更简便、更可靠、更快捷。 | ||
搜索关键词: | 一种 尿液 细胞 外囊泡 改良 提取 方法 | ||
【主权项】:
1.一种尿液小细胞外囊泡的改良提取方法,其特征在于按照如下方法进行密度梯度离心:将不同浓度梯度的蔗糖溶液按照浓度从低至高的顺序依次垫加入试管底部,形成自上而下浓度依次增加的梯度液,在梯度液最上层缓慢加注粗囊泡重悬液,离心;其中所述蔗糖溶液是pH8.4~8.8的20mm Tris‑HCL蔗糖重水溶液,所述粗囊泡重悬液是将粗囊泡重悬于pH8.4~8.8的20mm Tris‑HCL水溶液中制得。
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