[发明专利]一种肺癌干细胞的制备方法及应用有效
| 申请号： | 201910034168.7 | 申请日： | 2019-01-15 |
| 公开（公告）号： | CN109652377B | 公开（公告）日： | 2023-03-28 |
| 发明（设计）人： | 冷水龙;龚杰 | 申请（专利权）人： | 广州医科大学 |
| 主分类号： | C12N5/095 | 分类号： | C12N5/095 |
| 代理公司： | 广州恒华智信知识产权代理事务所(普通合伙) 44299 | 代理人： | 廖金燕 |
| 地址： | 511436*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种肺癌干细胞的制备方法及应用。该肺癌干细胞的制备方法为：步骤1)：配制含羧甲基纤维素钠的无血清DMEM/F12培养基A；其中，培养基A中羧甲基纤维素钠和无血清DMEM/F12培养基的质量体积比为0.25％以下；步骤2)：用培养基A把肺癌细胞制成单细胞悬液A，再向单细胞悬液A中加入维持肺癌干细胞干性的物质,得到混合液，将混合液在3D细胞培养条件下培养7天以上即可；或将维持肺癌干细胞干性的物质加到上述培养基A中，得到培养基B,用培养基B把肺癌细胞制成单细胞悬液B，再将单细胞悬液B在3D细胞培养条件下培养7天以上即可。本发明制备方法简单，高效稳定，肺癌干细胞干性高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 肺癌 干细胞 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种肺癌干细胞的制备方法，其特征在于，其制备方法为：步骤1)：配制含羧甲基纤维素钠的无血清DMEM/F12培养基A；其中，培养基A中羧甲基纤维素钠和无血清DMEM/F12培养基的质量体积比为0.25％以下；步骤2)：包括步骤A或步骤B；步骤A为:用培养基A把肺癌细胞制成单细胞悬液A，再向单细胞悬液A中加入维持肺癌干细胞干性的物质,得到混合液，将混合液在3D细胞培养条件下培养7天以上即可；步骤B)为:将维持肺癌干细胞干性的物质加到上述培养基A中，得到培养基B,用培养基B把肺癌细胞制成单细胞悬液B，再将单细胞悬液B在3D细胞培养条件下培养7天以上即可。
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- 巫国谊;丁义涛;庄永傑;詹珊珊 - 南京鼓楼医院
- 2017-03-17 - 2020-09-25 - C12N5/095
- 本发明公开了一种体外扩增肝癌干细胞的方法，包括以下步骤：将获得单细胞状态的人肝癌细胞，加入培养基中，制成细胞悬液；将细胞悬液滴加到多孔纤维素支架上，待细胞悬液渗入到多孔纤维素支架内部，置于细胞培养箱中培养贴附，然后再加入培养基置于细胞培养箱中培养数日，得到三维培养细胞；通过使用Western Blot、定量PCR、流式细胞术和IHC检测三维培养细胞中的肝癌干细胞标志分子EpCAM、OCT4、CD44和CD133表达情况的变化和（或）显微镜观察，检测转化的肝癌干细胞。本发明还公开了肝癌干细胞及其应用。本发明获得的肝癌干细胞具有耐药性。
- 一种无血清肿瘤干细胞培养基及其应用-201710765171.7
- 郑希;黄华容;刘婷;李冬利;张焜;周仁平;顾为望 - 五邑大学;江门市大健康国际创新研究院
- 2017-08-30 - 2020-06-12 - C12N5/095
- 本发明公开了一种无血清肿瘤干细胞培养基，所述无血清肿瘤干细胞培养基含有MCDB153基础培养基、细胞因子、蛋白多肽、抗生素、肾上腺素、硒、碳酸氢钠、脂类和红树林内生真菌代谢产物4(15)‑桉叶烯‑5,7‑二羟基‑1‑酮。本发明的肿瘤干细胞培养基不含血清，配方成分确定，具有较高的安全性，该无血清干细胞培养基可从恶性肿瘤细胞株和肿瘤组织中高效地富集肿瘤干细胞，能使肿瘤干细胞稳定生长，并维持其良好的细胞活性和生理特性，非常适合应用于肿瘤细胞及肿瘤干细胞的相关研究领域。
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