[发明专利]一种纤维素酶的生产方法和装置及其应用有效
申请号: | 201810931349.5 | 申请日: | 2018-08-15 |
公开(公告)号: | CN108893457B | 公开(公告)日: | 2020-02-14 |
发明(设计)人: | 张强;李忠玲;胡云红;韩珊珊 | 申请(专利权)人: | 陕西省生物农业研究所 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12M1/00;C12M1/38;C12M1/04;A23K20/189 |
代理公司: | 11670 北京栈桥知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 潘卫锋 |
地址: | 710043 陕西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种纤维素酶的生产方法,包括菌种培养:将采集到的菌源涂布在CMC‑Na培养基表面培养,使用波紫外线照射培养基,照射完毕后继续培养得到纤维素酶菌种;原料预处理:将玉米秸秆粉碎后高温灭菌;发酵:在发酵罐内加入纤维素酶菌种和生产原料,调节pH、温度和时间等参数,发酵期间使用空气净化压缩机向罐内通入无菌空气;浓缩干燥:将发酵液稀释后调节pH,使用超声震荡机震荡后进入真空过滤机过滤,过滤后滤液进入超滤浓缩机中进行浓缩,浓缩后通过冷冻干燥机干燥即得纤维素酶。总之,本发明具有工艺简单、原料利用率高、不易污染、产酶效率高、产酶质量稳定等优点。 | ||
搜索关键词: | 纤维素酶 发酵 纤维素酶菌种 产酶 过滤 浓缩 玉米秸秆粉碎 方法和装置 冷冻干燥机 原料利用率 原料预处理 真空过滤机 紫外线照射 空气净化 表面培养 超滤浓缩 超声震荡 高温灭菌 菌种培养 浓缩干燥 生产原料 无菌空气 质量稳定 培养基 发酵液 压缩机 菌源 稀释 照射 震荡 采集 生产 污染 应用 | ||
【主权项】:
1.一种纤维素酶的生产方法,其特征在于,主要包括以下步骤:/n步骤一:菌种培养/n选取碳源密集的腐质环境采集纤维素酶菌源,将采集到的菌源溶解在超纯水中,均匀涂布在CMC-Na培养基表面,在27-29℃下培养4-5天,挑取单菌落涂布于新的CMC-Na培养基,在27-29℃培养1天后,每间隔1h使用波长为220-240nm的紫外线在距离培养基表面28-33cm处照射30min,照射2-3次,照射完毕后继续培养2-3天得到纤维素酶菌种,在2-3℃下保存在菌种添加装置(1);/n步骤二:原料预处理/n将玉米秸秆送至粉碎灭菌机(2)中,关闭密封盖(21),粉碎电机(22)带动粉碎刀辊(23)以2300-2800r/min的转速粉碎30-40min后以80r/min保持搅拌,电加热器(24)开始工作,控制粉碎灭菌机(2)中温度在135-144℃之间处理原料2-3h,将原料中水分以水蒸气形式从排气口(25)排出,干燥灭菌后的原料粉末经筛板(26)进入发酵罐(3);/n步骤三:发酵/n在加入原料粉末的发酵罐(3)内加入与原料粉末质量比为1:1.25的纯水,搅拌均匀后使用菌种添加装置(1)向发酵罐(3)内加入步骤一中得到的纤维素酶菌种,控制物料与菌种重量比例为1:0.1-0.3,调节pH为4.0-5.0,温度控制器(31)控制发酵罐(3)内温度为25-35℃,发酵时间115-123h,发酵期间每隔5-7h开启空气净化压缩机(4)从发酵罐(3)底部的气道(32)向发酵罐(3)内通入无菌空气进行持续搅拌;/n步骤四:浓缩干燥/n向发酵完毕后的发酵罐(3)内加入与步骤三中相同质量的纯水搅拌稀释,然后调节发酵液pH至5.0,使用超声震荡机(5)以1.3-1.5MHz的频率震荡10-13min,然后经发酵罐(3)的出料口进入真空过滤机(6)进行真空过滤,过滤后滤液进入超滤浓缩机(7)中进行浓缩,浓缩后通过冷冻干燥机(8)干燥即得纤维素酶;/n所述步骤三和步骤四中添加的纯水温度为16-41℃。/n
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