[发明专利]电生理试验中记录微小电流的方法在审
| 申请号: | 201810783375.8 | 申请日: | 2018-07-17 |
| 公开(公告)号: | CN109164158A | 公开(公告)日: | 2019-01-08 |
| 发明(设计)人: | 苏彦华;郝东利;杨顺瑛 | 申请(专利权)人: | 中国科学院南京土壤研究所 |
| 主分类号: | G01N27/48 | 分类号: | G01N27/48 |
| 代理公司: | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人: | 杨文晰 |
| 地址: | 210008 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | 本发明公开一种电生理试验中记录微小电流的方法,其具体步骤如下:外源转运蛋白在细胞中表达后,将细胞钳制于‑70 mV,每隔70 S施加时长1.5 S、电压区间从‑160 mV到+20 mV变化的ramp程序以获取转运蛋白在不同条件下的电流响应特征,通过监控两次无铵条件下的电流重现性(基线波动控制在<5 nA)以及加铵下的电流重现性(电流波动控制在<10 nA或<5%,达到仪器的最低检测限),获得稳定可靠的铵转运蛋白底物诱导的微小电流,进而可检出<20 nA的微小电流变化;与传统的Gap‑free以及Step记录模式相比,本申请提供的记录方法极大的提高了数据获取的可靠性及便利性,可为利用电生理技术研究包括铵转运蛋白在内的各类转运体蛋白的功能提供有力技术支撑。 | ||
| 搜索关键词: | 微小电流 铵转运蛋白 转运蛋白 电生理 重现性 记录 电流波动控制 电生理技术 转运体蛋白 细胞 不同条件 底物诱导 电流响应 电压区间 功能提供 基线波动 技术支撑 记录模式 数据获取 便利性 传统的 钳制 试验 检出 时长 外源 施加 监控 检测 申请 研究 | ||
【主权项】:
1.一种电生理试验中记录微小电流的方法,其特征在于,具体步骤如下:外源转运蛋白在细胞中表达后,将细胞钳制于‑70 mV,每隔70 S施加时长1.5S、电压区间从‑160 mV到+20 mV变化的ramp电压,电压变化频率为0.12 mV/mS,以获得转运蛋白在不同电压下的电流响应特征。
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