[发明专利]整体凝胶复合材料制备及用于高效分离人血清中蛋白质和小分子物质

摘要

本发明公开整体凝胶复合材料制备及用于高效分离人血清中蛋白质和小分子物质，以水为溶剂和致孔剂，2‑羟基乙基甲基丙烯酸酯为基本单体，水溶性的二烯丙基二甲基氯化铵为新型交联剂，制备具有季铵盐官能团的基本凝胶Ⅰ，随后凝胶pDC通过在水溶液中分别与氧化石墨烯和聚乙烯亚胺的进行自组装制备凝胶复合材料Ⅱ，最后凝胶Ⅱ与N‑二乙基乙胺氢溴酸盐在水溶液中反应制备凝胶pDC/GO‑DE。当用凝胶pDC/GO‑DE对稀释10倍的血清样品中的蛋白质进行萃取时，10 min内蛋白萃取率大于95％，本发明不仅可以在生理条件下选择分离人血清样品中复杂各异的蛋白质和小分子物质，而且可以减少其中其他基质的干扰，符合GAC原则，建立了一种绿色高效的样品前处理方法。

主权项

1.一种整体凝胶复合材料的制备方法，其步骤是：以2.0 mL的离心管为模具，以水为溶剂，以2‑羟基乙基甲基丙烯酸酯为基本单体，以有季铵基的二烯丙基二甲基氯化铵为交联剂，单体和交联剂两者质量之和占总质量的8%，单体和交联剂摩尔比为3:1，将溶剂、单体和交联剂混合均匀，氮气鼓泡除氧10 分钟，用移液枪均匀移取0.3 mL混合液于模具中，再分别加入10 μL体积比为10 %四甲基乙二胺和10 μL质量分数比为5 %过硫酸铵水溶液，随后在零下20℃的冰箱中进行自由基聚合反应24 h；反应完毕，混合溶液变成含有季铵基的整体凝胶材料，室温下解冻，凝胶内部的冰晶融化成水，凝胶形成三维互通的大孔，二次水清洗，制备出凝胶Ⅰ；然后，将整体凝胶Ⅰ依次分别放入0.5 mg/mL含有羧基的氧化石墨烯GO和质量分数为2.5%含有胺基的聚乙烯亚胺b‑PEI水溶液中自组装，对凝胶Ⅰ的大孔表面修饰，超声30min后用二次水洗去未组装的GO或b‑PEI，重复自组装两次，制备出整体凝胶复合材料Ⅱ；最后，凝胶Ⅱ置于1M NaOH水溶液中，利用凝胶Ⅱ上的胺基与0.8 M 2‑溴‑N,N‑二乙基乙胺氢溴酸盐DE‑Br在60℃下反应30 min，反应结束，材料用10 mM pH7.4磷酸缓冲溶液和二次水清洗，制备出整体凝胶复合材料pDC/GO‑DE。