[发明专利]一种多肉植物月光寿的组织培养方法在审
| 申请号： | 201810213539.3 | 申请日： | 2018-03-15 |
| 公开（公告）号： | CN108308027A | 公开（公告）日： | 2018-07-24 |
| 发明（设计）人： | 严霖;黄显雅;毛立彦;龙凌云;石兰蓉;朱棚锦;宁琳;檀叶维;罗清;於艳萍;赵英 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区亚热带作物研究所 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 成都华风专利事务所(普通合伙) 51223 | 代理人： | 杜朗宇 |
| 地址： | 530001 广西壮*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种多肉植物月光寿的组织培养方法，包括以下步骤：挑选健康月光寿叶片清洗、消毒后，获得无菌外植体；将无菌外植体切段后接种到诱导愈伤组织培养基中进行愈伤组织的诱导；然后将愈伤组织切割成小块转入不定芽分化培养基中分化培养，获得丛生芽；最后将丛生芽单株分株后转入生根培养基中培养，获得带根的完整植株。本发明通过对月光寿叶片组织进行离体培养获得月光寿的组培苗，克服了多肉植物受到时间季节限制，取材短缺的局限性。该方法材料易得，消毒方便，成活率高，并能较好的保持月光寿品系优势，能快速大量繁殖出大量适合移栽的优良月光寿幼苗。 | ||
| 搜索关键词： | 无菌外植体 愈伤组织 组织培养 丛生芽 消毒 不定芽分化培养基 转入 诱导愈伤组织 生根培养基 分化培养 季节限制 离体培养 完整植株 叶片清洗 叶片组织 培养基 组培苗 单株 分株 切段 小块 幼苗 品系 成活率 移栽 接种 切割 取材 诱导 繁殖 健康 | ||
【主权项】：
1.一种多肉植物月光寿的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：D1外植体的选择与消毒：挑选健康月光寿叶片，用自来水流水冲洗，然后将其置于超净工作台中，用75%酒精消毒30 s，再用0.1% 氯化汞浸泡6 min，每次浸泡后都用灭菌水洗涤，最后用无菌滤纸吸干表面水分，获得无菌外植体；D2愈伤组织诱导：将无菌外植体切割成0.5～1.0 cm的切片，接种到诱导愈伤组织培养基中，在温度为25±2 ℃，光照强度1000～1200 lux，光照周期12 h/d，相对湿度50%～60%的环境下培养90～120 d，诱导出愈伤组织；所述的诱导愈伤组织培养基是以MS培养基为基本培养基，且每1 L的MS基本培养基中添加1.0～2.0 mg的6‑苄基腺嘌呤、0.1～0.2 mg萘乙酸、6.0～7.0 g琼脂、28～30 g蔗糖，并用氢氧化钠将其培养基的pH调为5.5～6.0；D3丛生芽诱导：将愈伤组织切割成0.5～1.0 cm的小块，直接转入不定芽分化培养基中分化培养以获得丛生芽，其中不定芽诱导培养条件为：温度25±2 ℃，光照强度1000～1200 lux，光照周期12 h/d，相对湿度50%～60%，培养时间90～120 d，在该培养条件下，愈伤组织分化成不定芽，分化出丛生芽后，连续培养90 d壮苗；所述的不定芽分化培养基是以MS培养基为基本培养基，且每1 L的MS基本培养基中添加0.5～0.8 mg的6‑苄基腺嘌呤、0.1～0.5 mg萘乙酸、6.0～7.0 g琼脂、28～30 g蔗糖，并用氢氧化钠将其培养基的pH调为5.5～6.0；D4诱导生根：将丛生芽单株分株后转入生根培养基中，在温度25±2 ℃，光照强度1000～1200 lux，光照周期12 h/d，相对湿度50%～60%的条件下培养50～60 d，得到带根的完整植株；所述的生根培养基是以1/2 MS培养基为基本培养基，且每1 L的1/2 MS基本培养基中添加0.1～0.15 mg的6‑苄基腺嘌呤、1～1.5 mg吲哚丁酸、6.0～7.0 g琼脂、28～30 g蔗糖，并用氢氧化钠将其培养基的pH调为5.5～6.0。
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- 本发明属于茶树繁殖技术领域，公开了一种茶树组培快繁体系的建立方法，包括：取从温室剪下的茶树枝条，去掉大的叶片，剪取带腋芽的节结，用洗洁精清洗表面；在无菌室内酒精浸没，用次氯酸钠溶液浸泡，用无菌水冲洗；进行无菌室内消毒；在25℃光照13小时/天光强1000Lux初代培养；继代培养；诱导生根；试管苗移栽和炼苗。本发明采用稳定的培养环境使得外植体按集合级数增殖增并可以周年生产；可用于形成工厂化生产，按一定工艺流程规范化程序化生产的；具有繁殖速度快、整齐、一致、无虫少病、生长周期短、遗传性稳定的特点。
- 一种愈伤组织诱导的暴马丁香组培苗的炼苗移栽方法-201710984377.9
- 舒钰;邢亚娟;李春明;王丹;赵学丽;王钰婷;曹焱 - 黑龙江省林业科学研究所
- 2017-10-20 - 2019-11-01 - A01H4/00
- 本发明提供了一种愈伤组织诱导的暴马丁香组培苗的炼苗移栽方法，属于植物组培技术领域。本发明提供的愈伤组织诱导的暴马丁香组培苗的炼苗移栽方法包括：取愈伤组织诱导的暴马丁香组培苗进行炼苗5～10d，得炼苗后小苗，所述炼苗的温度为15～18℃，光照强度为800～1000lx，每天光照5～8h，炼苗湿度为70～80％；将得到的所述炼苗后小苗移栽至移栽基质中，每天向小苗根部的基质中添加营养液。经过本发明的炼苗移栽过程，愈伤组织诱导的暴马丁香组培苗的移栽成活率高达91％以上，本发明提供的炼苗移栽方法操作简单，人工成本低，解决了暴马丁香愈伤组织诱导的组培苗移栽之后成活率低的问题。
- 一种甜樱桃砧木无性克隆脱毒苗的培养方法-201910436372.1
- 史月龙;吴延军;高志红;吴坤林;杨艳;夏鹏;徐亚琴 - 南京千亩休闲农业发展有限公司
- 2019-05-23 - 2019-10-29 - A01H4/00
- 本发明公开了一种甜樱桃砧木无性克隆脱毒苗的培养方法，涉及植物组织培养技术领域。本发明包括以下步骤：选种，分别选取美早、黑珍珠、拉宾斯和莫利作为培养对象，截取枝丫末端25厘米的穗条，将截取面削成锥状，依次命名为A组、B组、C组和D组，称重编码，将A组、B组、C组和D组中每枝穗条进行编码，编码完成后分别给每枝穗条进行称重，记录称重数据。本发明通过对植株进行热处理和穗尖培养脱毒，再配合培养溶液中的三氮唑核苷进行化学脱毒，多种脱毒方式组合可以降低组织中的病毒数量，提高樱桃植株的抗性，间接提高樱桃的产量。
- 一种新几内亚凤仙组培快繁方法-201910562649.5
- 黄美娟;黄海泉;黄小云;黄武略;魏杰;汪琼;闻永慧;鄢波 - 西南林业大学
- 2019-06-26 - 2019-10-29 - A01H4/00
- 本发明涉及植物栽培领域，具体涉及一种新几内亚凤仙组培快繁方法，通过将无菌苗处理成带下胚轴及近轴半端子叶的子叶节作为诱导不定芽为诱导不定芽的最佳外植体，使得发明不定芽诱导率为100％，外植体诱导不定芽诱导率高，平均诱导不定芽40.71个，且诱导出的未分化芽点较多，具有较高的分化能力；本发明通过种子灭菌、外植体诱导不定芽、不定芽增殖培养和生根培养利于新几内亚凤仙的快速与大量繁殖。
- 一种以大白菜腋芽为外植体的快速繁育方法-201810376924.X
- 刘倩倩;刘维信 - 青岛农业大学
- 2018-04-25 - 2019-10-29 - A01H4/00
- 本发明提供了一种以大白菜腋芽为外植体的快速繁育方法，具体包括以下步骤：切下腋芽作为外植体；对腋芽进行灭菌，清洗；将腋芽置于芽增殖培养基上进行培养；将外植体上增殖的芽切下，蘸取IBA溶液，在非琼脂固体培养基中进行不定根诱导；将再生苗转入花盆基质中置于室温下，给予自然光照培养。本发明以大白菜腋芽为外植体，对增殖培养基中植物生长调节物质的使用浓度进行了优化。利用已有的芽原基进行个体增殖，提高了大白菜组织培养的再生效率，成芽速度快，且受基因型影响较小。培养过程简单，可以在短时间内对优异的育种材料和种质资源及时扩繁与利用，大大加速育种进程，为解决AA基因组作物的再生难题提供了新的途径。
- 一种木薯脆性胚性愈伤组织的培养方法-201710265105.3
- 李瑞梅;郭建春;姚远;刘姣;段瑞军;符少萍 - 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
- 2017-04-21 - 2019-10-29 - A01H4/00
- 本发明公开了一种木薯脆性胚性愈伤组织的培养方法，包括以下步骤：(一)脆性胚性愈伤组织诱导；(二)脆性胚性愈伤组织再生。该木薯脆性胚性愈伤组织的培养方法具有脆性胚性愈伤组织诱导产生时间短，产生率高的优点，且木薯优选为华南8号和华南6号等常规栽培品种。
- 一种基于顶端分生组织转分化的林木芽再生方法-201910101703.6
- 桑亚林;张宪省;程志娟;费芳芳;左芸;孟文静 - 山东农业大学
- 2019-01-31 - 2019-10-29 - A01H4/00
- 本发明公开了一种基于顶端分生组织转分化的林木芽再生方法，包括以下步骤：(1)取林木组培苗的根为外植体，将外植体在含有生长素NAA的B5培养基中培养20‑26h；(2)将步骤(1)培养后的外植体转入含有细胞分裂素2‑IP的B5培养基中培养10‑14天；(3)将步骤(2)培养后的外植体转入含有细胞分裂素6‑BA的MS培养基中培养14‑18天，获得再生芽。本发明的林木芽再生方法不经过愈伤组织阶段直接形成茎端分生组织，从而产生再生芽，因此适用于建立研究植物细胞命运决定、谱系转变等科学问题的实验体系，适用于难以形成具有再生能力愈伤组织的物种建立芽再生体系，进而进行离体快繁、遗传转化或其他生物技术操作。
- 一种高通量对少量水稻种子组培消毒的装置-201920259148.5
- 戈有彪;文云;毛凌华 - 江西春丰农业科技有限公司
- 2019-03-01 - 2019-10-29 - A01H4/00
- 本实用新型提供了一种高通量对少量水稻种子组培消毒的装置，涉及人类生活必需技术领域，该装置包括箱体、三个试管板、两个分隔板、转轴电机、两个转动杆、两个连接件、三个盖板、三个支撑板和连接柱，通过一个箱体内容纳数个试管板，试管板上开设数个试管孔的方式，将组培消毒所使用的多种试管容纳其中，并且通过转轴电机、主动转动机构和从动转动机构模拟人力晃动，改善了高通量前提下试管使用过多导致占地面积大，对环境要求严格，并且难以对试管进行晃动让其固液更好的混合的问题，结构简单，电动机械仅使用了转轴电机，维修方便，并且通过简单的结构解决水稻种子组培消毒的数量过多导致占用面积过大的问题。
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