[发明专利]一种牛羊肉中己烯雌酚、雌二醇、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇雌激素残留量的测定方法

摘要

本发明公开了一种牛羊肉中己烯雌酚、雌二醇、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇雌激素残留量的测定方法，包括1）配制流动相、设置色谱条件；2）标准品贮备液的配制、供试样品处理；3）混合标样的配制；4）线性回归分析；5）供试样品中雌激素含量的测定步骤。该方法可以同时检出牛羊肉中4种雌激素的残留量，具有检出限低、灵敏度高、操作简便快速、结果准确可靠、检测条件限制较小的优点，具有很大的推广性，同样适用于其他激素类药物。

主权项

一种牛羊肉中己烯雌酚、雌二醇、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇雌激素残留量的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：1）配制流动相、设置色谱条件流动相：甲醇：磷酸氢二钠溶液体积比80:20；色谱条件：检测波长210‑400nm，流速为1.0ml/min，柱温：40℃，进样量为10μl；2）标准品贮备液的配制、供试样品处理①称取己烯雌酚、雌二醇、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇的标准品各50mg，分别定容至50ml，制成1.0mg/ml标准品贮备液，备用；②称取供试牛羊肉样品，用甲醇进行两次超声萃取‑离心操作，取两次离心后的上清液蒸干后加甲醇，过滤，制成供试品处理液，准备上机；3）混合标样的配制分别吸取2.5ml步骤2）得到的己烯雌酚、雌二醇、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇标准贮备液并混合，再将混合液用甲醇分别稀释至雌激素浓度为0.4mg/ml、0.5mg/ml、1.0mg/ml，制成混合标样，备用；4）线性回归分析将步骤2）得到的雌二醇、己烯雌酚、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇的单个标准品贮备液过滤，以步骤1）的条件依次注入HPLC中，根据标准品的出峰时间进行定性，然后将步骤3）得到的0.4mg/ml、0.5mg/ml、1.0mg/ml的混合标样过滤，以步骤1）的条件依次注入HPLC中，以4种混标的峰面积比与其质量浓度进行线性回归分析，得4种混标的线性回归方程；5）供试样品中雌激素含量的测定将步骤2）得到的供试品处理液以步骤1）的条件注入HPLC中，以峰面积、按步骤4）得到的线性回归方程计算供试品处理液中己烯雌酚、雌二醇、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇的含量，然后计算供试牛羊肉样品中己烯雌酚、雌二醇、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇的残留量。