[发明专利]基于α-羟基酸的蛋白纯化方法有效
| 申请号： | 201611240228.3 | 申请日： | 2016-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN107354189B | 公开（公告）日： | 2018-11-02 |
| 发明（设计）人： | 安泰;王磊;陈博;杨鑫;朱威宇;朱镜羲;林海龙;牛兴和;郝小明 | 申请（专利权）人： | 中粮营养健康研究院有限公司;中粮集团有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/00 | 分类号： | C12P21/00;C07K19/00;C07K1/14;C12N1/21;C12N1/15;C12N1/19;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290 | 代理人： | 洪俊梅;张淑珍 |
| 地址： | 102209 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于α‑羟基酸对目的蛋白进行纯化的方法。具体而言，本发明的蛋白纯化方法通过将α‑羟基酸和功能片段与目的蛋白相连，利用功能片段进行纯化，随后通过改变pH条件使得α‑羟基酸水解，从而获得目的蛋白。该纯化方法适用于对多种表达系统表达的蛋白进行纯化，具有成本低、流程简单、易于工业化实现等优点，可用于实验室规模的高通量蛋白纯化，也有利于工业化规模的低成本蛋白生产。 | ||
| 搜索关键词： | 蛋白纯化 目的蛋白 羟基酸 功能片段 工业化规模 表达系统 蛋白生产 低成本 高通量 酸水解 可用 羟基 蛋白 | ||
【主权项】：
1.一种蛋白纯化方法，所述方法包含如下步骤：a)在宿主细胞中表达融合蛋白，所述融合蛋白包含目的蛋白、用于纯化的功能片段以及连接所述目的蛋白和所述功能片段的α‑羟基酸；b)使得所述融合蛋白与所述宿主细胞分离；以及c)提供使得所述α‑羟基酸发生水解的环境，将所述目的蛋白与所述功能片段相分离，从而获得纯化的所述目的蛋白，其中，步骤c)中，所述使得所述α‑羟基酸发生水解的环境是pH为9～11的环境；所述水解的时间为1‑48h；所述水解的温度为4‑100℃。
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