[发明专利]一种羰基还原酶突变体及其基因与应用有效
| 申请号： | 201611203762.7 | 申请日： | 2016-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN106754775B | 公开（公告）日： | 2019-08-20 |
| 发明（设计）人： | 张志钧;郁惠蕾;李敏;许建和;潘江 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学 |
| 主分类号： | C12N9/04 | 分类号： | C12N9/04;C12N15/53;C12P41/00;C12P7/62 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人： | 褚明伟 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种羰基还原酶突变体及其基因，包含该羰基还原酶突变体基因的重组表达载体和重组表达转化体，该重组酶的制备方法，以及该重组酶在不对称还原4‑氯‑3‑羰基丁酸乙酯及其他潜手性羰基化合物以制备光学纯(S)‑4‑氯‑3‑羟基‑丁酸乙酯及其他手性仲醇中的应用。与野生型羰基还原酶相比，本发明所述羰基还原酶突变体对4‑氯‑3‑羰基丁酸乙酯的还原活力有大幅提高，且部分突变体的热稳定性也有明显提高，使用该突变体能够更好地催化制备光学纯(S)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯，具有很好的工业应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 羰基还原酶 突变体 丁酸乙酯 制备 光学纯 重组酶 羰基 重组表达转化体 重组表达载体 羟基丁酸乙酯 不对称还原 突变体基因 羰基化合物 工业应用 还原活力 热稳定性 手性仲醇 野生型 基因 手性 羟基 催化 应用 | ||
【主权项】：
1.一种羰基还原酶突变体，其特征在于，其是如下新氨基酸序列组成的活性提高的羰基还原酶突变体：(1) 将如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第158位异亮氨酸替换为缬氨酸；(2) 将如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第158位异亮氨酸替换为缬氨酸，第168位脯氨酸替换为丝氨酸；(3) 将如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第60位丙氨酸替换为苏氨酸，第158位异亮氨酸替换为缬氨酸，第168位脯氨酸替换为丝氨酸。
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- 2016-12-14 - 2019-07-09 - C12N9/04
- 本发明公开了葡萄糖脱氢酶及其编码基因与应用。本发明所提供的葡萄糖脱氢酶是a)或b)或c)的蛋白质：a)由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)由SEQ ID No.6所示的氨基酸序列组成的蛋白质；c)在a)或b)所示的蛋白质的羧基端或/和氨基端融合蛋白标签得到的融合蛋白。本发明的葡萄糖脱氢酶CrGDH3A‑His在25℃pH7.8的条件下其葡萄糖脱氢酶的酶活力为39.47±1.03U/mg蛋白，葡萄糖脱氢酶CrGDH3A在40℃，pH7.4的条件下的葡萄糖脱氢酶的酶活力为36.53±1.16U/mg。本发明为应用基因工程手段培育磷高效农作物新品种以及高效活化土壤磷素养分的生物工程菌提供重要基因资源。
- 一种产胆固醇氧化酶的蜡样芽孢杆菌的发酵产酶方法-201910271077.5
- 迟乃玉;希伦;张庆芳;刘洋;于爽 - 大连大学
- 2019-04-04 - 2019-07-02 - C12N9/04
- 本发明涉及一种产胆固醇氧化酶的蜡样芽孢杆菌的发酵产酶方法，属于生物工程领域。该方法是以蜡样芽孢杆菌菌株为菌种进行发酵产酶，进而制备出胆固醇氧化酶。本发明通过筛选优化所得的发酵培养基和产酶方法具有发酵周期端，条件温和，易于控制，提供的最佳发酵条件，具有产酶效率高，且酶活力高，酶活力稳定等优点，有利于后一步进行应用方面研究。
- 一种短链脱氢酶及其基因、重组表达载体、基因工程菌及其在虾青素手性中间体合成中的应用-201610900528.3
- 于洪巍;李爱朋 - 浙江大学
- 2016-10-17 - 2019-06-28 - C12N9/04
- 本发明提供一种短链脱氢酶，及其基因，重组短链脱氢酶，含有该基因的重组表达载体，和基因工程菌，该重组酶的制备方法，以及该短链脱氢酶或含有该酶的基因工程菌在不对称还原潜手性酮合成虾青素手性中间体中的应用。本发明中所述短链脱氢酶不对称还原制备手性醇具有显著优点，能够合成高光学纯度虾青素手性中间体(ee>99％)。催化剂易于制备、反应条件温和、底物适应性广、环境友好，且其重组细胞能够在不外加任何辅酶的含异丙醇反应体系中高效催化潜手性酮的不对称还原，具有很好的工业化应用开发前景。
- 异丁香酚单加氧酶突变体及其应用-201710035143.X
- 赵丽青 - 深圳大学
- 2017-01-17 - 2019-06-25 - C12N9/04
- 本发明公开了一种异丁香酚单加氧酶突变体及其应用，异丁香酚单加氧酶突变体包括SEQ 2所示的氨基酸序列，其具有选自第120位、第121位、第281位、第298位和第470位中的至少一个突变。本发明通过对异丁香酚单加氧酶基因进行定点突变，以获得具高催化活性的异丁香酚单加氧酶突变体。该突变体能以异丁香酚为底物，高效率催化生成香草醛；以异丁香酚为底物其具有比亲本高出至少117％的异丁香酚单加氧酶催化活性。
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