[发明专利]过表达尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因及其重组嗜酸乳杆菌的构建方法有效

专利信息
申请号: 201611115500.5 申请日: 2016-12-07
公开(公告)号: CN106520794B 公开(公告)日: 2019-08-20
发明(设计)人: 曾小群;彭刘杨;潘道东;孙洁;黄芩;吴振;孙杨赢;曹锦轩 申请(专利权)人: 宁波大学
主分类号: C12N15/54 分类号: C12N15/54;C12N15/75;C12N1/21;C12R1/23
代理公司: 宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙) 33226 代理人: 何仲
地址: 315211 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了过表达尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因及其重组嗜酸乳杆菌的构建方法,特点是具体步骤如下:(1)以嗜酸乳杆菌基因组DNA为模板,扩增尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因LBA0625;将表达载体pMG36e用限制性内切酶HindⅢ单酶切,并去磷酸化切胶回收后,将PCR扩增产物插入到表达载体pMG36e构建重组表达载体;(2)将过表达质粒提取浓缩后电转化导入至嗜酸乳杆菌,37℃复苏2h后,涂布红霉素抗性平板,再在37℃培养36h筛选转化子;转化子经PCR进行验证,从而获得过表达尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因的重组嗜酸乳杆菌PLY127‑1,优点是能显著提高嗜酸乳杆菌冻干存活率。
搜索关键词: 表达 二磷酸 葡萄糖 磷酸化酶 基因 及其 重组 酸乳 杆菌 构建 方法
【主权项】:
1.一种过表达尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因,其特征在于:所述基因来自于嗜酸乳杆菌ATCC 4356编码尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶的基因,其核苷酸序列如序列表中SEQ ID No:1所示。
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