[发明专利]一种检测人类MTHFR基因677位点的酶切方法在审
| 申请号: | 201610149791.3 | 申请日: | 2016-03-16 |
| 公开(公告)号: | CN105695586A | 公开(公告)日: | 2016-06-22 |
| 发明(设计)人: | 孙淼;徐兴顺;徐智策 | 申请(专利权)人: | 苏州大学附属第一医院 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 曹毅 |
| 地址: | 215006 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种检测人类MTHFR基因677位点的酶切方法,包括提取血液基因组DNA,设计特异性引物,PCR扩增反应及酶切鉴定等步骤。本发明采用基因组DNA的PCR扩增结合限制性内切酶方法,可快速准确鉴定MTHFR基因677位点基因型,仅需要PCR仪等基本设备仪器,结果准确易懂,非专业人员也可分析,且成本低,是一种可以广泛应用于临床检验的方法。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 检测 人类 mthfr 基因 677 方法 | ||
【主权项】:
一种检测人类MTHFR基因677位点的酶切方法,其特征在于,包含以下步骤:(1)提取受试者血液基因组DNA;(2)以人类MTHFR基因677位点附近序列设计特异性引物,上游引物:GATGCTTGTTGGCCAAAGTACAAC,下游引物:GATTTGCTTGGCTGCTCAAGG;(3)使用步骤(2)中的特异性引物,以步骤(1)提取的基因组DNA为模板,进行PCR扩增反应,获得扩增产物,电泳检测扩增产物;(4)采用限制性内切酶TaqI,TthHB8I,TaqaI中的任意一种酶切步骤(3)获得的扩增产物;(5)电泳检测经步骤(4)酶切后的产物,并进行分型判断结果。
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