[发明专利]一种检测生物柴油中甘油酯和游离脂肪酸含量的方法

摘要

本发明公开了一种测定生物柴油中甘油酯和游离脂肪酸含量的方法，所述方法为：将生物柴油样品稀释，以铝箔片基层析硅胶板作薄层色谱分离，以体积比90:10:2的正己烷、乙酸乙酯、甲酸混合溶剂为展开剂，用碘蒸汽显色，分离后，将显色的甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯和游离脂肪酸的斑点裁下，裁下的斑点与三甲基氢氧化硫的甲醇溶液装入样品杯，装入裂解器中，将裂解器置于GC进样口处，当裂解器温度达到300～450℃时进样，气相色谱检测，获得待测样品的气相色谱图，与甘油一酯、二酯、三酯和游离脂肪酸的标准曲线对照计算得到待测样品中甘油酯和游离脂肪酸的含量。本方法操作简单，定量准确，信息全面，对生物柴油的质量控制具有十分深远的意义。

主权项

一种检测生物柴油中甘油酯和游离脂肪酸含量的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)制作甘油一酯标准曲线：以硬脂酸甘油一酯作为甘油一酯的标准品，硬脂酸甘油一酯用乙酸乙酯溶解，配成不同浓度的硬脂酸甘油一酯标准溶液，各取1μL点样，在铝箔片基层析硅胶板上进行薄层色谱分离，以体积比90:10:2的正己烷、乙酸乙酯、甲酸混合溶剂为展开剂，当溶剂前沿扩展到铝箔片基层析硅胶板的另一端后，将铝箔片基层析硅胶板拿出，待溶剂挥干后，用碘蒸汽显色，显色后，将显色的甘油一酯斑点裁下，裁下的斑点装入样品杯，并加入3μL的0.2mol/L三甲基氢氧化硫的甲醇溶液，将上述样品杯固定于进样杆后，装入裂解器中，将裂解器置于气相色谱仪进样口处，当裂解器温度达到300～450℃时进样，气相色谱检测，获得硬脂酸甘油一酯在线甲基化反应所得的硬脂酸甲酯的气相色谱图；以气相色谱图中的峰面积为纵坐标，硬脂酸甘油一酯的标准溶液浓度为横坐标，绘制硬脂酸甘油一酯的标准曲线，即为甘油一酯标准曲线；(2)以硬脂酸甘油二酯作为甘油二酯的标准品，硬脂酸甘油三酯作为甘油三酯的标准品，油酸作为游离脂肪酸的标准品，按照上述步骤(1)操作，分别获得甘油二酯、甘油三酯和游离脂肪酸的标准曲线；(3)待测生物柴油样品用乙酸乙酯稀释2～6倍，取1μL点样，在铝箔片基层析硅胶板上进行薄层色谱分离，以体积比90:10:2的正己烷、乙酸乙酯、甲酸混合溶剂为展开剂，当溶剂前沿扩展到铝箔片基层析硅胶板的另一端后，将铝箔片基层析硅胶板拿出，待溶剂挥干后，用碘蒸汽显色，对比步骤(1)、(2)中各标准品的斑点显色位置，将显色的甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯和游离脂肪酸的斑点分别裁下，裁下的斑点各自装入样品杯，并加入3μL的0.2mol/L三甲基氢氧化硫的甲醇溶液，将各样品杯分别固定于进样杆后，装入裂解器中，将裂解器置于气相色谱仪进样口处，按照步骤(1)的条件进样并进行气相色谱检测，分别获得甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯和游离脂肪酸在线甲基化反应所得的脂肪酸甲酯混合物的气相色谱图；将待测样品的甘油一酯的气相色谱图中所有脂肪酸甲酯峰的总峰面积与甘油一酯标准曲线对照，计算获得待测样品中甘油一酯的含量；将待测样品的甘油二酯的气相色谱图中所有脂肪酸甲酯峰的总峰面积与甘油二酯标准曲线对照，计算获得待测样品中甘油二酯的含量；将待测样品的甘油三酯的气相色谱图中所有脂肪酸甲酯峰的总峰面积与甘油三酯标准曲线对照，计算获得待测样品中甘油三酯的含量；将待测样品的游离脂肪酸的气相色谱图中所有脂肪酸甲酯峰的总峰面积与游离脂肪酸标准曲线对照，计算获得待测样品中游离脂肪酸的含量。