[发明专利]一种快速检测灰飞虱体内水稻条纹病毒和水稻黑条矮缩病毒的方法

摘要

本发明提供了一种快速同步检测昆虫介体灰飞虱体内水稻条纹病毒(RSV)和水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)的方法，属植物保护领域。根据水稻条纹病毒RNA4和水稻黑条矮缩病毒S2核苷酸序列设计三条引物：[A]RS-F，[B]RB-F，[C]RSRB-R，其中A/C组合检测水稻条纹病毒，B/C组合检测水稻黑条矮缩病毒。单头灰飞虱提取总RNA后，只需一个反应的RT-PCR，即可检测水稻条纹病毒和水稻黑条矮缩病毒两种病毒，实现了灰飞虱体内两种病毒的快速同步检测。相对于传统的一次RT-PCR反应检测一种病毒的方法，大大节约了成本，节省了时间，是一种快速、简便、灵敏、特异的检测方法。本方法可应用于田间灰飞虱群体带毒率的监测工作，也可应用于病毒与介体互作机制的相关研究工作。

主权项

一种快速检测灰飞虱体内水稻条纹病毒和水稻黑条矮缩病毒的方法，其特征在于：利用RSV‑RNA4片段与RBSDV‑S2片段之间的一段相似序列合理设计引物，RSRB‑R：5’‑CCYATCACAAASAAATMAAAAT‑3’，RS‑F：5’‑AGATCCAGAGAGAGTCACGGAAG‑3’，RB‑F：5’‑GTTCAAAGACAATACACTCAAAA‑3’，其中RS‑F/RSRB‑R配对检测水稻条纹病毒(1114bp)，RB‑F/RSRB‑R配对检测水稻黑条矮缩病毒(414bp)，以实现灰飞虱体内水稻条纹病毒和水稻黑条矮缩病毒的快速同步检测。