[发明专利]一种五指毛桃的组织培养快速繁殖方法

摘要

一种五指毛桃的组织培养快速繁殖方法，包括如下步骤：(1)取五指毛桃叶片作为外植体进行消毒；(2)将消毒后的外植体置于MS基本培养基中诱导得到丛生芽；(3)将所述丛生芽置于MS繁殖培养基中进行繁殖；(4)将丛生芽切成单芽置于1/2MS生根培养基中培养得到完整的带根苗；(5)取完整的带根苗进行炼苗后移植到按质量比为泥炭土:珍珠岩＝1:1的基质中，在该基质中生长一个月后移栽大田。采用本发明所述方法得到的种苗健壮、成活率高，可在短期内提供大量五指毛桃的优质种苗，有效解决了五指毛桃的规模化育苗问题。

主权项

一种五指毛桃组织培养快速繁殖方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：(1)外植体的选择与消毒：取五指毛桃叶片作为外植体，依次用5％洗洁精水溶液浸泡5‑10min、线状自来水冲洗10‑15min、添加了2‑3滴吐温‑20的100毫升0.1％升汞消毒8‑10min、无菌水冲洗3‑5次，最后用消毒滤纸吸去表面水分，得到外植体，所述无菌水为经高压灭菌的蒸馏水，(2)叶片分化获得丛生芽诱导培养：将步骤(1)得到的外植体接种到MS培养基中，在培养温度为23‑26℃，光照强度1400‑2000lux，光照时间为10‑12小时/天的条件下培养30天，叶片分化后获得丛生芽，其中MS培养基中含0.5‑1.5mg/L的6‑BA、0.1‑0.5mg/L的NAA、0.1‑0.5mg/L的2,4‑D、25‑30g/L蔗糖和3.8‑4.8g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(3)丛生芽繁殖培养：将步骤(2)中得到的丛生芽置于MS繁殖培养基中，在培养温度23‑26℃，光照强度1400‑2000lux，光照时间为10‑12小时/天的条件下培养40天得到健壮植株，其中MS繁殖培养基中含0.1‑0.5mg/L的IAA、0.1‑0.5mg/L的KT、25‑30g/L蔗糖和3.8‑4.8g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(4)无菌苗生根培养：将步骤(3)中得到的丛生芽切成单芽置于1/2MS生根培养基中，在培养温度23‑26℃，光照强度1400‑2000lux，光照时间为10‑12小时/天的条件下培养40天得到带根的完整植株，其中MS生根培养基中含0.5‑1.5mg/L的IBA、0.1‑0.5mg/L的NAA、25‑30g/L蔗糖和3.8‑4.8g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(5)炼苗与移栽：步骤(4)获得带根的完整植株后，在室温为25℃的室内打开瓶盖，在瓶中加入少量自来水，炼苗2‑4天，表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基，立即移栽到按质量比为泥炭土:珍珠岩＝1:1的基质中，在该基质中生长一个月后移栽大田。