[发明专利]一种在同一只大鼠体内建立多种疾病模型的方法及其应用

摘要

本发明提供一种在同一只大鼠体内建立多种疾病模型的方法。通过本发明的方法，在同一只大鼠体内同时建立了心肌缺血、脑缺血、高血脂、高血糖、风湿性关节炎等病症的模型，经过检测相关特异性指标确证了多种疾病模型已建立。本发明更真实的反映了临床人体病症及并发症存在的实际情况，为药物筛选提供了更高效的方法，缩短了研发周期，减少了动物使用数量，降低了成本，有较大的应用价值。

主权项

1.一种在同一只大鼠体内建立多种疾病动物模型的方法，其特征在于该方法包括下列步骤：(1)建立大鼠高血脂模型选取无特定病原体级Wistar大鼠，雄性，160±10g，适应无特定病原体级动物实验室环境3天，实验前1天，称体重，禁食不禁水12小时，眼眶后静脉丛取血测定血清中总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白含量；选择血脂中总胆固醇在1.5-2.5mmol/L之间、甘油三酯在1.0-2.0mmol/L之间的大鼠分为正常组和模型组，正常组喂以普通饲料：水分7.42％、粗蛋白22.35％、粗脂肪5.68％、粗灰分5.16％、粗纤维7.24％、钙1.24％、磷0.89％、水溶性氯化物0.40％，模型组喂以高脂饲料：8％蛋黄粉、1.5％胆固醇、10％猪油、0.1％胆盐30天，并采用试剂盒测定血中总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇的含量，并以模型组和正常组血脂水平比较有统计学上的显著差异为造模成功的标准；(2)在完成(1)步骤后的大鼠中建立高血脂和风湿性关节炎模型在完成(1)步骤后的模型组大鼠右足掌皮内注射10mg/ml的Freund’s佐剂，连续观察8天，并测定正常组和模型组大鼠足肿胀的厚度，并以模型组大鼠足掌厚度和正常组大鼠比较有统计学上的显著差异P＜0.05为造模成功的标准；(3)在完成(2)步骤后的大鼠中建立高血脂和风湿性关节炎及高血糖模型在完成(2)步骤后的正常组和模型组大鼠均禁食24小时，于模型组大鼠腹腔注射50mg/kg链尿菌素，测定大鼠血糖的含量，以模型组大鼠血糖值和正常组大鼠血糖值比较有统计学上的显著差异为造模成功的标准P＜0.05；(4)在完成(3)步骤后的大鼠建立高血脂和风湿性关节炎及高血糖并心肌缺血模型在完成(3)步骤后的大鼠的实验过程中，以10％的乌拉坦腹腔注射麻醉，气管插管，接人工呼吸机，开胸，于冠状动脉左前降支结扎，测定结扎前及结扎后10分钟、20分钟、30分钟、60分钟的心电图变化，于结扎2.5小时后取心脏测定心肌梗死面积；以模型组大鼠T波值和正常组大鼠T波值比较有统计学上的显著差异P＜0.05和出现心肌梗死为造模成功的标准；(5)在完成(4)步骤后的大鼠建立高血脂和风湿性关节炎及高血糖并心肌缺血又脑缺血模型在完成(4)步骤大鼠的实验后，立即取大鼠右侧颈部切口，分离出颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉，并沿着颈内动脉向下分离翼腭动脉，将栓线从右侧颈总动脉切口处缓慢插入约20毫米再向回拉2毫米，固定栓线，缝合伤口，术后24小时，进行神经行为学评分和取脑测定脑梗死面积；神经行为学评分标准为：0分行为无异常；0.5分竖毛，轻度运动低下；1.0分前肢屈曲，运动障碍；2.0分行动不协调，屈曲姿势，旋转运动；3.0分偏瘫，不能站立和行走；4.0分痉挛，昏睡；5.0分死亡；1-3分为造模成功。