[发明专利]一种适用于植物样本的总DNA的快速抽提方法

权利要求书

1.一种适用于植物样本的总DNA的快速抽提方法，其特征在于：具体包括以下几个步骤：

S1、材料研磨；取200mg植物叶片样本置于液氮中，研磨成粉末状后转入2.0ml离心管中备用；

S2、提取液萃取；

a.在步骤S1中所得的研磨后的粉末状叶片样本中加入700μl裂解液，随后将离心管放置到涡旋仪震荡10s以使粉末均匀分散；

b.将步骤S2a中的离心管在常温下，13000rpm离心5min，静置后取500μl上清液到新的离心管中；

c.在S2b步骤中加入上清液的离心管中加入等体积的异丙醇，室温沉降5min；常温下，13000rpm离心10min，倒掉上清液获得DNA沉淀；

S3、DNA沉淀的洗涤和溶解；

a.第一次洗涤DNA沉淀，在步骤S2c中得的DNA沉淀中加入75％的乙醇，轻弹离心管底部，使DNA沉淀重悬，于常温下12000rpm离心10min，倒掉上清液，获得DNA沉淀；

b.第二次洗涤DNA沉淀，在步骤S3a步骤中得的DNA沉淀中加入75％的乙醇，轻弹离心管底部，使DNA沉淀重悬，于常温下12000rpm离心10min，弃尽上清液；将离心管至于烘箱中37度干燥15min或室温干燥1h。

2.根据权利要求1所述的一种适用于植物样本的总DNA的快速抽提方法，其特征在于：所述S2a中裂解液的组分为2％CTAB，1.4M NaCl，20mM EDTA，100mM Tris-HCl。

3.根据权利要求1所述的一种适用于植物样本的总DNA的快速抽提方法，其特征在于：在S3b步骤中第二次洗涤DNA沉淀前，离心管内部加入6μlRNA酶(20mg/ml)。

4.根据权利要求3所述的一种适用于植物样本的总DNA的快速抽提方法，其特征在于：在S3b中离心管放入烘箱中37度干燥15min或室温干燥1h后，向干燥后的DNA中加入50μl的ddH2O。

5.根据权利要求4所述的一种适用于植物样本的总DNA的快速抽提方法，其特征在于：在步骤S3a中抽提出DNA之后，在S3步骤之前对离心管中加入甲醇溶液洗涤沉淀，甲醇溶液洗涤次数为1-3次，沉淀时长15-30min，倒出沉淀后的上清液。

6.根据权利要求5所述的一种适用于植物样本的总DNA的快速抽提方法，其特征在于：经过甲醇溶液洗涤沉淀之后，使用DTT丙酮对沉淀后的DNA洗涤沉淀，随后对离心管内部抽提。

7.根据权利要求5或6所述的一种适用于植物样本的总DNA的快速抽提方法，其特征在于：其中甲醇和DTT丙酮洗涤沉淀时，首先甲醇与DNA沉淀配比为1：1；其中DTT丙酮与DNA沉淀配比为1：1。