[发明专利]一种用于构建Ⅱ型糖尿病、高血脂血症斑马鱼模型的方法及应用

权利要求书

1.一种用于构建Ⅱ型糖尿病、高血脂血症斑马鱼模型的方法，其特征在于，通过给予高糖高脂饲料构建Ⅱ型糖尿病、高血脂血症斑马鱼模型；

所述的高糖高脂饲料是由高糖饲料和高脂饲料混合制备获得的；

其中，高脂饲料由干燥蛋黄粉制备获得的；所述的高糖饲料为质量浓度为0.5-3%的葡萄糖工作液。

2.如权利要求1所述的用于构建Ⅱ型糖尿病、高血脂血症斑马鱼模型的方法，其特征在于，所述高糖高脂饲料中的高脂饲料由如下方法制备获得：

a.剔除次蛋、劣蛋、破损蛋，挑选新鲜完整的鸡蛋；用棕刷刷洗鸡蛋壳表面后，用清水冲净感染的菌类和污物；

b. 将晾干后的鸡蛋放入氢氧化钠水溶液中浸渍，消毒后取出再晾干；

c. 将蛋清与蛋黄分离，蛋黄液搅拌均匀，用10-30目筛布过滤除去蛋膜、系带及其它杂质，再用巴氏消毒器60-70 ℃低温消毒；

d. 将消毒后的蛋黄液与清水按照质量体积比为1：1-3混合，喷雾干燥得到干燥蛋黄粉；

e.临用前用胚胎营养液将干燥蛋黄粉稀释成质量浓度为0.05~0.15%的高脂饲料，现配现用。

3.如权利要求1所述的用于构建Ⅱ型糖尿病、高血脂血症斑马鱼模型的方法，其特征在于，所述高糖高脂饲料中的高糖饲料是由葡萄糖用胚胎营养液配成的质量浓度为1-3%工作液，现配现用。

4.如权利要求1所述的用于构建Ⅱ型糖尿病、高血脂血症斑马鱼模型的方法，其特征在于，所述的高糖高脂饲料是高糖、高脂饲料混合后获得的混合饲料；混合饲料中葡萄糖质量浓度为1-3%，蛋黄粉质量浓度0.05-0.15%。

5.如权利要求2所述的用于构建Ⅱ型糖尿病、高血脂血症斑马鱼模型的方法，其特征在于，步骤d喷雾干燥条件为：干燥室进风温度设置为170-240 ℃，出风温度控制在60-75 ℃。

6.如权利要求2所述的用于构建Ⅱ型糖尿病、高血脂血症斑马鱼模型的方法，其特征在于，步骤d喷雾干燥条件为：干燥室进风温度设置为170-230 ℃，出风温度控制在60-70 ℃。

7.如权利要求1所述的用于构建Ⅱ型糖尿病、高血脂血症斑马鱼模型的方法，其特征在于，具体的步骤如下：

（1）斑马幼鱼获取

将3~6个月大小、性成熟的野生型斑马鱼进行繁殖，繁殖后的鱼卵，移入胚胎培养液中培养，鱼卵破壳成为幼鱼；

（2）取同等数量的斑马鱼放置于空白组、阳性对照、高脂模型组、高糖模型组、高脂高糖模型组中；

空白组斑马鱼给予胚胎培养液；

高脂模型组给予蛋黄粉质量浓度为0.05-0.15%的高脂饲料；

高糖模型组给予葡萄糖质量浓度为0.50-3%的高糖饲料；

高脂高糖模型组给予含葡萄糖质量浓度为0.50-3%、蛋黄粉质量浓度为0.05-0.15%的高脂高糖饲料；

降糖药阳性对照组给予含葡萄糖质量浓度为0.50-3%、蛋黄粉质量浓度为0.05-0.15%的高脂高糖饲料，再添加盐酸吡格列酮使溶液中盐酸吡格列酮终浓度为15 μg/mL；

降脂药阳性对照组给予含葡萄糖质量浓度为0.50-3%、蛋黄粉质量浓度为0.05-0.15%的高脂高糖饲料，再添加阿托伐他汀钙使溶液中阿托伐他汀钙终浓度为15 μg/mL；

恒温箱中26-29 ℃连续培养6-7天，获得高糖、高脂斑马鱼模型。

8.一种如权利要求1所述方法构建的Ⅱ型糖尿病、高血脂血症斑马鱼模型在高血糖、高血脂病例机制研究中的应用。

9.一种如权利要求1所述方法构建的Ⅱ型糖尿病、高血脂血症斑马鱼模型在评价治疗Ⅱ型糖尿病或高血脂药物中的应用。