[发明专利]一种多核苷酸的测序方法

权利要求书

1.一种多核苷酸的测序方法，其特征在于，包括：

提供多条固定的多核苷酸模板链；

提供测序试剂，按照预先测序反应顺序进行反应；在所述预先测序反应顺序中，主要包括两种不同的测序试剂：第一测序试剂和第二测序试剂；在测序反应循环中，两种测序试剂交替循环加入；其中所述第一测序试剂包含具有可检测标记的两种不同的核苷酸单体；所述第二测序试剂包含具有可检测标记的两种不同的核苷酸单体，且所述两种不同的核苷酸单体均不同于所述第一测序试剂中存在的所述核苷酸单体，并且其中所述第二测序试剂是在提供了所述第一测序试剂随后提供的，将所述核苷酸单体掺入所述多核苷酸之后检测所述可检测标记生成的信号；

在预先选定的部分测序反应循环中，通入的测序试剂仅包含按照所述预先测序反应顺序应加入的测序试剂中的两种核苷酸单体中的一种；

所述测序反应指的是3’端不封闭的测序反应。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，第一测序试剂包含A,C，第二测序试剂包含G,T；当预先选定的测序反应循环按照预先反应顺序应加入第一测序试剂时，该测序试剂可以只包含A或者只包含C；当预先选定的测序反应循环原本应加入第二测序试剂时，该测序试剂可以只包含G或者只包含T。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，第一测序试剂包含A,G，第二测序试剂包含C,T；当预先选定的测序反应循环按照预先反应顺序应加入第一测序试剂时，该测序试剂可以只包含A或者只包含G；当预先选定的测序反应循环原本应加入第二测序试剂时，该测序试剂可以只包含C或者只包含T。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，第一测序试剂包含A,T，第二测序试剂包含C,G；当预先选定的测序反应循环按照预先反应顺序应加入第一测序试剂时，该测序试剂可以只包含A或者只包含T；当预先选定的测序反应循环原本应加入第二测序试剂时，该测序试剂可以只包含C或者只包含G。

5.根据权利要求2-4任一项所述的方法，其特征在于，所述预先选定的部分测序反应循环占所有反应循环的比例不高于35％，优选的不高于25％。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，在预先选定的部分测序循环中，加入的核苷酸单体共有一种核苷酸，选自A,G,C,T(或U)，且所述一种核苷酸单体的分布是近似均匀的。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，在预先选定的部分测序循环中，加入的核苷酸单体共有两种类型，选自A,G,C,T(或U)，且两种核苷酸单体的数量是接近的，两种核苷酸单体的分布是近似均匀的。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，在预先选定的部分测序循环中，加入的核苷酸单体共有三种类型，选自A,G,C,T(或U)，且三种核苷酸单体的数量是接近的，三种核苷酸单体的分布是近似均匀的。

9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，在预先选定的部分测序循环中，加入的核苷酸单体共有四种类型，选自A,G,C,T(或U)，且四种核苷酸单体的数量是接近的，A,G,C,T(或U)四种核苷酸单体的分布是近似均匀的。

10.根据权利要求6-9任一项所述的方法，其特征在于，在预先选定的部分测序循环中，相邻的奇数测序循环加入的不是同一种类的核苷酸单体，相邻的偶数测序循环加入的不是同一种类的核苷酸单体。

11.一种对核酸序列信息进行校正的方法，其特征在于，根据权利要求1-10任一项所述的方法测序得到测序信号，并对所述测序信号进行错误校正。