[发明专利]一种鉴定雌鹿产品种源的引物组和试剂盒及其鉴定方法

说明书

本发明属于基因检测技术领域，提供了一种鉴定雌鹿产品种源的引物组和试剂盒及其鉴定方法，所述引物组包括上游外引物F67、上游内引物F201w1、下游内引物R247m5和下游外引物R552，所述上游外引物F67的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述上游内引物F201w1的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，所述下游内引物R247m5的核苷酸序列如SEQ IDNO：3所示，所述下游外引物R552的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。利用本发明所述引物组及鉴定方法可以特异地检测得到雌鹿产品的真伪和是否为杂交品种并能判定亲本来源，为雌鹿产品的真伪鉴定和杂交种鉴定提供科学依据。

技术领域

本发明涉及种源检测技术领域，尤其涉及一种鉴定雌鹿产品种源的引物组和试剂盒及其鉴定方法。

背景技术

鹿是我国传统的名贵药用动物，其身上多个部位均可用于治疗疾病以及具有强身健体等多种功能。鹿产品作为一种多基元的中药材和补品，其质量品控一直是中药材研究中的重点，对于该类药材的品质以及质量把控需要多方位的考量。国家药典委员会2020药典规定，鹿茸的来源有且仅有梅花鹿和马鹿两种基元，其他鹿种来源则认为是伪品。实际上，即使是被视作正品的梅花鹿和马鹿的鹿产品的成分含量及药效也具有一定差异。一般来说，纯种梅花鹿的药用和营养价值高于马鹿，前者的市场价格也为后者的3倍左右。随着动物杂交育种技术的发展，我国鹿养殖业尤其是梅花鹿、马鹿养殖数量和鹿种之间的杂交利用一直处于世界领先水平，其中梅花鹿♂×马鹿♀形成的花马杂交被认为是经济效益最佳的杂交组合，其后代个体发育和雄鹿鹿茸生长速度均高于亲本，具有较好的杂种优势。但基于鹿茸的常规成分、氨基酸含量以及无机元素等多方面的成分测定结果表明，杂交鹿茸与纯种梅花鹿鹿茸的营养成分仍存在差异，因而市场价格也一直存在较大差别。单就鹿茸产品来说，纯种梅花鹿鹿茸与杂交后代的鹿茸从外观形态和气味就难以进行区分，进而在其他产品尤其是一些分割或深加工产品更难以判定鹿种来源，从而导致市场中杂交鹿产品与纯种鹿产品混淆售卖的现象，这样给一些不法商贩利用杂交鹿产品冒充纯种梅花鹿产品进行售卖而获得更高的利润提供了可乘之机。

针对鹿茸的真伪问题已经有诸多鉴定技术的研究应用，尤其是基于DNA分析技术的发展已经基本满足鹿茸真伪及杂交来源的鉴定。对于一些无法辨别雌雄且深加工产品，例如鹿心、鹿血以及鹿心粉等，则有多种基于线粒体DNA基因如COI和CytB测序技术用来鉴定是否为鹿源性成分及判定鹿种的鉴定方法，也有联合使用Y染色体的SRY基因进行性别鉴定的技术，在很大程度上满足了鹿茸和雄鹿鹿血、鹿心等产品的真伪和来源鉴定。养殖业生产中，雌鹿个体往往用于繁殖后代，多数母鹿饲养利用时间在10年以上，因此雌鹿来源的鹿血、鹿肉产品数量少。近年来，随着杂交鹿群养殖数量的增加和出栏率提高以及母鹿淘汰数量的增加，杂交雌鹿产品如鹿肉、鹿心、鹿血和鹿胎等产品逐步进入市场，但目前的鉴定检测技术尚无法解决雌性杂交鹿的亲本来源问题，尤其是父系来源的判定。

发明内容

本发明的目的在于提供一种鉴定雌鹿产品种源的引物组和试剂盒及其鉴定方法，利用本发明所述引物组和鉴定方法可以特异地检测得到雌鹿产制品的真伪和是否为杂交品种并能判定亲本来源，为雌鹿产品的真伪鉴定和杂交种鉴定提供科学依据。在本发明中，首先对待检测鹿产品样本进行性别鉴定，鉴定为雄性的鹿产品可使用Y染色体联合线粒体基因进行物种鉴定以及杂交种源鉴定；鉴定为雌性样本则可进行后续检测步骤。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种鉴定雌鹿产品种源的引物组，包括上游外引物F67、上游内引物F201w1、下游内引物R247m5和下游外引物R552，所述上游外引物F67的核苷酸序列如SEQ IDNO：1所示，所述上游内引物F201w1的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，所述下游内引物R247m5的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，所述下游外引物R552的核苷酸序列如SEQ IDNO：4所示。具体如下：

F67(SEQ ID NO：1)：5'-GCTGATGCTACACACACGGAT-3'；