[发明专利]靶向人HER2的CAR、CAR基因及其重组载体、CAR-M细胞及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 202211401400.4 | 申请日： | 2022-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN115746149A | 公开（公告）日： | 2023-03-07 |
| 发明（设计）人： | 杨海霞;杨桂花;赵进军 | 申请（专利权）人： | 和携科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/867;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京维正专利代理有限公司 11508 | 代理人： | 胡利彦 |
| 地址： | 102600 北京市大兴区北京经济*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 靶向 her2 car 基因 及其 重组 载体 细胞 制备 方法 应用 | ||
1.一种靶向人HER2的CAR，其特征在于，包括前导肽、胞外识别区、铰链区、跨膜区、胞内信号域；
所述胞外识别区为结合肿瘤抗原的HER2单链抗体；所述跨膜区为能够激活巨噬细胞吞噬信号的FcγRⅠ、FcγRⅡ、FcγRⅢ、FCER1G、CD36中的任意一种；所述胞内信号域为氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示的P2结构域。
2.根据权利要求1所述靶向人HER2的CAR，其特征在于，所述靶向人HER2的CAR的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。
3.一种CAR基因，其特征在于，所述CAR基因编码权利要求1-2中任一项所述靶向人HER2的CAR。
4.一种重组载体，其特征在于，包括权利要求1所述靶向人HER2的CAR或权利要求3所述的CAR基因。
5.一种CAR-M细胞，其特征在于，包括权利要求4所述的重组载体。
6.如权利要求5所述的CAR-M细胞的制备方法，其特征在于，由权利要求4所述的重组载体导入巨噬细胞中获得。
7.根据权利要求6所述的CAR-M细胞的制备方法，其特征在于，所述巨噬细胞为小鼠骨髓来源巨噬细胞。
8.根据权利要求6所述的CAR-M细胞的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
从N端到C端顺序依次将所述前导肽、所述胞外识别区、所述铰链区、所述跨膜区与所述胞内信号域进行连接，得到所述靶向人HER2的CAR；
将所述靶向人HER2的CAR与慢病毒载体重组，构建得到所述重组载体；
将所述重组载体导入所述巨噬细胞中，得到所述CAR-M细胞。
9.权利要求1-2中任一项所述靶向人HER2的CAR，权利要求3所述的CAR基因，权利要求4所述的重组载体以及权利要求5所述的CAR-M细胞在制备治疗肿瘤药物中的应用。
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