[发明专利]一种基于FeSe2

说明书

本发明属于新型功能材料与生物传感技术领域，涉及一种基于硒化亚铁‑金纳米粒子(FeSe₂‑Au NPs)的电化学传感器的制备，用于灵敏检测生物血清细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment antigen 21‑1,CYFRA21‑1)。分别制备作为基底的FeSe₂‑Au NPs复合材料和作为标记物的甲苯胺蓝负载在聚丙烯酸官能化ZIF‑67(PAA‑ZIF‑TB)的复合材料，基于此构建三明治型免疫传感器，使用比率型（差示脉冲伏安法）进行检测。根据此方法构建的电化学免疫传感器用于测定实际血清样本中的CYFRA21‑1浓度，表现出优异的稳定性和灵敏度，为检测CYFRA21‑1提供了一种新的检测方法。

技术领域

本发明涉及一种电化学免疫传感器的制备与应用，具体说是一种以FeSe₂-Au NPs为传感平台，以PAA-ZIF-TB为标记物的三明治型免疫传感器，本发明属于新型功能材料、生物传感技术领域。

背景技术

肺癌是对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一，占所有癌症病例的13%，是全世界癌症死亡的主要原因，也是全球性重大公共卫生问题之一；肺癌初始发病较隐匿，早期没有特征性临床症状，80%的肺癌患者到院确诊时已发展到中晚期，错失了最佳治疗时机，因此肺癌的早期发现及诊断在整个治疗中尤为重要；血清细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment antigen 21-1, CYFRA21-1)作为检测肿瘤的生物标志物，现阶段广泛应用于诊断癌症；我们需要开发新的检测方法完成对CYFRA21-1的检测。

电化学免疫传感器是基于免疫传感器更加进步的一种分析检测技术，而且是免疫传感器中研究最早也较为成熟的一个分支。电化学免疫传感器将高灵敏性的电化学检测系统与高选择性的免疫识别系统相结合，广泛应用于生物标记物的检测。电化学免疫传感器具有高选择性、高灵敏性和低检出限等优点，在免疫分析方面具有广泛的应用。

在本次工作中， 将FeSe₂作为生物传感器中的电化学信号探针，有着优良的EC性能，强烈的信号输出，将其成功的运用到电化学生物传感器中。但是不足的是，FeSe₂的电导率低，将Au NPs负载在FeSe₂表面可以改善材料的导电性，并且Au NPs表面存在大量的活性位点可以固定抗体。因此，我们制备了FeSe₂-Au NPs作为生物传感器的基质。具有电活性的甲苯胺蓝(TB）是一种吩噻嗪阳离子染料，可以发生氧化还原反应，将它作为电化学生物传感器的氧化还原探针是一种不错的选择。ZIF-67由Co阳离子和咪唑配体构成，作为ZIF家族的一种，具有大的比表面积、可控的孔隙率和较多的瞄定位点受到广泛关注。在吸附领域的应用前景是非常可观的，有报道已经证明ZIF-67对阳离子有很好的吸附性能。聚丙烯酸（PAA）官能化的ZIF-67呈电负性，通过静电吸附作用与TB结合，增加对TB的吸附量，提高免疫传感器的灵敏度。根据此方法构建的电化学免疫传感器用于测定实际血清样本的CYFRA21-1浓度，表现出优异的稳定性和选择性，为CYFRA21-1的检测提供了一种新的方法。

发明内容

本发明的目的之一是制备一种以FeSe₂-Au NPs为传感平台，以PAA-ZIF-TB为标记物的三明治型免疫传感器。

本发明的目的之二是将该传感器用于CYFRA21-1的高灵敏、特异性检测。

本发明的技术方案如下：

1. 一种基于FeSe₂-Au和PAA-ZIF-TB的比率型电化学免疫传感器的制备：

(1) 将玻碳电极用抛光粉打磨，再使用去离子水清洗，将电极置于5 mmol/L铁氰化钾溶液中，并在-0.6 ~ 0.6 V电位下进行扫描，使峰电位的差值小于110 mV；

(2) 将6 μL，2 ~ 4 mg/mL FeSe₂-Au NPs溶液滴加在电极上，室温下干燥；