[发明专利]前列腺酸性磷酸酶的定量检测试剂盒

说明书

本申请涉及前列腺酸性磷酸酶的定量检测试剂盒。具体而言，本申请的试剂盒包含：缓冲液、激活剂、表面活性剂、防腐剂、底物、快红TR盐、酒石酸盐等。本申请的试剂盒重复性和稳定性好、抗乳糜能力强；线性高可达200U/L。

技术领域

本申请涉及生物学、生物化学、临床检验领域。具体而言，本申请涉及一种用于定量检测样本中前列腺酸性磷酸酶水平或含量的试剂。

背景技术

酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)是一类在酸性环境下催化磷酸单酯水解的酶。ACP广泛存在于人体各组织及体液中(如前列腺、红细胞、血小板、肾脏、肝脏、脾脏、胃、肌肉及骨髓)，以前列腺含量最多。正常男性血清中ACP有1/3至1/2来自于前列腺。在骨骼相关疾病、血液相关疾病中，ACP也均有升高。

ACP简单分为前列腺ACP(PAP)和非前列腺ACP(nACP)，其中PAP能被酒石酸抑制，而nACP大部分不被酒石酸抑制或抗酒石酸。

PAP(prostatic acid phosphatase)在前列腺疾病中会有明显升高，并可作为前列腺癌的标志物。与前列腺特异性抗原(PSA)相比，PAP能够更精确指示肿瘤的转移(Shahana等人，Prostate Cancer，Volume 2017，ID5687212)。

现有技术中，可以采用α-磷酸萘酚底物法、Badan-sky法、Roy单磷酸酯法、2-氯-4-硝基苯磷酸单钾盐(CNP-PK)底物法等测量PAP。α-磷酸萘酚底物法以磷酸萘酚为底物，经ACP水解后释放萘酚，再与快红TR盐(也作固红，一种4-氯-2-甲基苯重氮盐)发生偶氮化反应；通过在405nm处监测偶氮化合物生成的速率进行ACP动力学法测定。

CN102706861A公开了一种酸性磷酸酶活性测定试剂，其包括：缓冲液(pH4.0至5.0)0.05至0.5M、磷酸萘酚1至100mm、固红TR 1至100mm、去干扰剂1至100mm、稳定剂0.1至10g/L、激活剂0.1至10g/L、防腐剂0.1至10g/L。

CN103808712A公开了一种用于酸性磷酸酶检测的液体试剂盒，包括基质液和显色液，所述基质液含有酸性磷酸酶的底物(α-萘基磷酸酯)，所述显色液含有显色剂(选自重氮盐，优选4-氯-2-甲基苯重氮化盐)。

CN109576343公开了一种连续法测定酸性磷酸酶活性的试剂盒：1)4-硝基-1-萘基磷酸酯作为显色底物溶解在pH 4.5至6.0的0.05至0.20M柠檬酸-柠檬酸钠中，浓度0.10mM到5.0mM；2)pH 4.5至6.0的0.05至0.20M柠檬酸-柠檬酸钠、叠氮钠、苯甲酸或抗生素。通过连续跟踪440至470nm波长下的吸收变化，以底物4NNPP及其产物的差消光系数换算出产物的生成速度，以指示酸性磷酸酶活性。

发明内容

根据一些实施方案，提供了一种前列腺酸性磷酸酶的定量检测试剂盒，其包含至少一个试剂。例如，一个、两个、三个、四个或更多个。各试剂分别置于不同的容器中。

在一些实施方案中，各试剂各自独立地是液体的或干粉的(如冻干粉)形式。

定量是指对样本中的待测物进行定量，获得待测物可量化的信息(如，但不限于浓度、水平、活性)。

三试剂

在一些实施方案中，试剂盒是三试剂的形式。

根据一些实施方案，提供了一种前列腺酸性磷酸酶的定量检测试剂盒，其是三试剂(第一、第二、第三试剂)。

应当理解，本申请中“第X”仅用于区分不同的特征、物质、步骤、化学实体，而非意图限制其次序、程度、水平或重要性。

在一些实施方案中，第一试剂包含或由以下组成：