[发明专利]一种检测食品中花生衣红素含量的方法及其应用

权利要求书

1.一种确定花生衣红素主要成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.对花生衣红素进行质谱鉴定，选取响应值峰值前四的特征峰，确定响应时间，然后计算质荷比，跟已知化合物数据库的质荷比比对，确定分子式，并根据碎片离子信息校核，确定四个特征峰对应的物质分别为芦丁、桑色素、槲皮素、异鼠李素；

S2.以标准溶液的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标分别绘制芦丁、桑色素、槲皮素、异鼠李素的液相色谱标准曲线，并确定保留时间；

S3.对花生衣红素进行色谱分析，根据保留时间确定对应物质的种类，然后根据标准曲线分别确定四种物质的含量；

S4.根据式（1）计算即得花生衣红素的含量，其中

式（1）

式中：m为花生衣红质量，g；c_n为芦丁、桑色素、槲皮素或异鼠李素的浓度，ug/mL；V为定容体积，mL；f为稀释倍数；k为4种化合物的总和在花生衣红素中的占比系数。

2.根据权利要求1所述的确定花生衣红素主要成分的方法，其特征在于，步骤S4中，所述占比系数k为0.00088。

3.根据权利要求2所述的确定花生衣红素主要成分的方法，其特征在于，芦丁的液相色谱标准曲线为Y=23.1X-9.6、桑色素的液相色谱标准曲线为Y=25.4X-5.4、槲皮素的液相色谱标准曲线为Y=75.4X-28.7、异鼠李素的液相色谱标准曲线Y=81.9X-7.0。

4.权利要求1-3任一所述的确定花生衣红素主要成分的方法在食品中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述食品为肉灌肠、碳酸饮料、糖果或饼干。

6.一种检测食品中花生衣红素含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）预处理待测食品样品，萃取，取上清液旋蒸，定容；

2）将定容后的样品液进行液相色谱分析，根据保留时间确定芦丁、桑色素、槲皮素、异鼠李素分别对应的特征峰，然后根据芦丁、桑色素、槲皮素、异鼠李素的液相色谱标准曲线分别计算芦丁、桑色素、槲皮素、异鼠李素4种物质含量；

3）根据式（1）计算即得花生衣红素的含量，其中

式（1）

式中：m为花生衣红质量，g；c_n为芦丁、桑色素、槲皮素或异鼠李素的浓度，ug/mL；V为定容体积，mL；f为稀释倍数；k为4种化合物的总和在花生衣红素中的占比系数。

7.根据权利要求6所述的检测食品中花生衣红素含量的方法，其特征在于，步骤3）中，所述占比系数k为0.00088。

8.根据权利要求7所述的检测食品中花生衣红素含量的方法，其特征在于，色谱分析的条件为：采用C18柱色谱柱；甲醇为流动相A，1%甲酸/水为流动相B，流速为1.0 mL/min；进样量10 µL；柱温为35℃；芦丁和桑色素的紫外检测波长为325 nm，槲皮素和异鼠李素的紫外检测波长为370 nm；梯度洗脱条件：1~3 min，20% A；3~8 min，20%~80% A；8~13 min，80%~100% A；13~15 min，100%~20%。

9.根据权利要求7或8所述的检测食品中花生衣红素含量的方法，其特征在于，预处理待测食品样品，萃取，取上清液旋蒸，定容的具体过程为：如果待测食品样品是固体，则取粉碎后的待测食品样品1000g,加入50:50乙醇水1000 mL，超声40 min，过滤，取上清液600mL，加入150 mL正己烷进行液液萃取，移取萃取后上清液500 mL，80 ℃真空旋蒸；旋蒸至近干，用50:50乙醇水定容至5 mL即得样品液；

若待测食品样品为液体，则待测食品样品1000mL,加入500ml乙醇,80度抽真空旋蒸；旋蒸至近干，然后用50:50乙醇水分别定容至5ml即得样品液。

10.根据权利要求9所述的检测食品中花生衣红素含量的方法，其特征在于，样品液采用0.22 µm尼龙滤器过滤后再进行液相色谱分析。