[发明专利]一种促进血管内皮细胞增殖和血管生成的培养液

说明书

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种促进血管内皮细胞增殖和血管生成的培养液。本发明提供一种促进血管内皮细胞增殖和血管生成的培养液，其采用干细胞无血清培养基的上清液，所述上清液中含有表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、角质细胞生长因子、肝细胞生长因子和血管内皮生长因子。本发明能有效促进血管内皮细胞的增殖，提高细胞的体外扩增速度，促进血管内皮细胞的血管分化，有利于改善再生医学中血管网络构建过程中所存在的血管生成缓慢和血管不足的问题。此外，本发明的培养液避免了使用血清导致的异种成分排斥现象，安全性高，成分明确。本发明为血管内皮细胞的扩大培养和临床应用提供了有效的培养基配方，适合推广应用。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种促进血管内皮细胞增殖和血管生成的培养液。

背景技术

在生物体的生命过程中，血管形成是一个重要的生理过程。在组织工程中，大面积损伤的修复过程伴随着血管网络的重建。血管网络的缺失可能导致细胞因营养、氧气和细胞因子的缺乏而坏死，进而影响修复过程。事实上，血管生成是组织再生的标志，促进血管生成是再生医学的目标之一。

血管内皮细胞参与组织修复的过程。血管内皮细胞的迁移有助于维持血管壁内皮的完整性和新血管的生长，在伤口愈合过程中，增殖的血管内皮细胞首先迁移到受损血管处，再以出芽或非出芽的方式形成新生的血管。在组织修复的初始阶段，血管内皮细胞迁移到新生的肉芽组织中形成初始状态的毛细血管为新生的肉芽组织提供营养。促进血管内皮细胞迁移至受损组织并形成新生的血管参与组织修复，是血管生成领域的研究热点。目前间充质干细胞用于血管生成治疗的能力已被证实，间充质干细胞与血管内皮细胞的共培养结果显示出干细胞显著的促血管生成能力，有望为临床治疗提供新思路。

但是，间充质干细胞的移植治疗存在一些限制因素，如移植的间充质干细胞分化潜能降低、较低的存活率及生存期相对较短等导致移植治疗效果不佳，此外移植治疗还有可能导致肿瘤的发生等，阻碍了其在临床治疗的应用。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

发明的目的在于提供一种促进血管内皮细胞增殖和血管生成的培养液。

根据本发明具体实施方式的促进血管内皮细胞增殖和血管生成的培养液，所述培养液采用干细胞无血清培养基的上清液，并且所述上清液中含有表皮细胞生长因子1-20ng/mL、碱性成纤维细胞生长因子1-20ng/mL、角质细胞生长因子1-30ng/mL、肝细胞生长因子1-30ng/mL和血管内皮生长因子1-30ng/mL。

根据本发明具体实施方式的促进血管内皮细胞增殖和血管生成的培养液，表皮细胞生长因子的浓度为5-15ng/mL。

根据本发明具体实施方式的促进血管内皮细胞增殖和血管生成的培养液，碱性成纤维细胞生长因子的浓度为5-15ng/mL。

根据本发明具体实施方式的促进血管内皮细胞增殖和血管生成的培养液，角质细胞生长因子的浓度为10-20ng/mL。

根据本发明具体实施方式的促进血管内皮细胞增殖和血管生成的培养液，肝细胞生长因子的浓度为10-20ng/mL。

根据本发明具体实施方式的促进血管内皮细胞增殖和血管生成的培养液，血管内皮生长因子的浓度为10-20ng/mL。

其中，所述细胞因子包括人源性细胞因子或重组人细胞因子。

相关因子的溶液溶剂包括PBS、DMSO、DDH₂O等，优选为PBS。

根据本发明具体实施方式的促进血管内皮细胞增殖和血管生成的培养液，干细胞无血清培养基为间充质干细胞无血清培养基或乳牙牙髓间充质干细胞无血清培养基。