[发明专利]一种四氢氧杂蒽酮二聚体类化合物及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种式(Ⅰ)所示四氢氧杂蒽酮二聚体类化合物及其制备方法与在制备抗菌药物中的应用，本发明筛选的篮状真菌WHUF0362培养方便易存活，利用该篮状真菌WHUF0362发酵提取的化合物(I)，对幽门螺旋杆菌具有一定的抑制作用，MIC值为达到0.125μg/mL，其提取分离方法简易，便于对其进行进一步的药理和临床研究，为开发疗效好且毒副作用小的新型抗菌药物创造条件。

(一)技术领域

本发明涉及一种四氢氧杂蒽酮二聚体类化合物及其制备方法与应用。

(二)背景技术

海洋真菌是一类生活在海洋中的能形成孢子且有真核结构的微生物。大多数真菌栖于某种基物而生活，真菌在海洋中的分布主要取决于寄主的分布，在潮间带高潮线、河口、浅海沙滩、深海沉积物及众多海洋生物中均有分布。海洋真菌次级代谢产物具有结构丰富多样、生物活性谱广且强度高的特点，是海洋活性天然产物的重要来源。生物活性主要有抗菌、抗肿瘤、抗氧化、酶抑制活性等。如现已广泛用于临床的抗生素头孢菌素C，是从海洋真菌中分离获得。

Wu等人曾报道分离自海洋红树林来源的真菌Aspergillus versicolor HDN1009的发酵液中的secalonic acid D，该化合物对HL-60、K562、A549、803、HO-8910和HCT-116细胞系表现出细胞毒性。但从海洋微生物中获得具有抗幽门螺旋杆菌的化合物文献报道较少。

本发明筛选得到一株新菌株-海洋来源的篮状真菌WHUF0362，经发酵培养获得的四氢氧杂蒽酮二聚体类化合物，迄今在国内外尚未见有抗幽门螺旋杆菌活性的相关专利或文献报道。

(三)发明内容

本发明目的是提供一种四氢氧杂蒽酮二聚体类化合物及其制备方法和在制备抗菌药物中的应用，该化合物利用篮状真菌WHUF0362发酵培养制备，具有抑制幽门螺旋杆菌26695、幽门螺旋杆菌G27、幽门螺旋杆菌159、幽门螺旋杆菌129活性，为治疗幽门螺旋杆菌感染提供了新的途径。

本发明采用的技术方案是：

第一方面，本发明提供了一种式(Ⅰ)所示四氢氧杂蒽酮二聚体类化合物：

第二方面，本发明提供了一种式(Ⅰ)所示四氢氧杂蒽酮二聚体类化合物的制备方法，所述方法包括如下步骤：

(1)发酵培养：篮状真菌(Talaromyces sp.)WHUF0362接种至大米培养基中，室温(25-30℃)静置发酵10-15天(优选15天)，得到发酵物；所述大米培养基是将大米与水以质量比1：1-10混合而成，优选1:1.5；所述大米可以是可食用稻米，优选东北大米；所述篮状真菌(Talaromyces sp.)WHUF0362保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期2021年11月30日，保藏编号CCTCC NO：M20211516，地址：中国武汉武汉大学；

(2)粗提物：将发酵物搅拌分散，加入等体积的乙酸乙酯超声提取，过滤，滤液减压浓缩至无液体冷凝，干燥(优选60℃干燥5h)，得到粗提物；

(3)分离提取：

a、粗提物采用正相硅胶色谱柱分离，依次用体积比10:1、1:1石油醚-乙酸乙酯，体积比30：1、5：1二氯甲烷-甲醇，纯甲醇作为洗脱剂进行洗脱，洗脱速度均为10-30mL/min(优选20mL/min)，洗脱体积均为2-6个(优选5个)柱体积，每瓶接500mL流出液，经薄层层析(TLC，二氯甲烷-甲醇9:1，v/v)点板监测，合并Rf为0.71-1.0的流出液，记为组分A1；合并Rf为0.61-0.7的流出液，记为组分A2；合并Rf为0.51-0.6的流出液，记为组分A3；合并Rf为0.41-0.5的流出液，记为组分A4；合并Rf为0.31-0.4的流出液，记为组分A5；合并Rf为0.21-0.3的流出液，记为组分A6；合并Rf为0.1-0.2的流出液，记为组分A7；