[发明专利]月季植物进行航天诱变育种的方法

权利要求书

1.月季植物进行航天诱变育种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、航天搭载前材料预处理

选择月季当年生的枝条，选取饱满而未萌发的腋芽茎段，去除腋芽茎段上的叶片和叶柄剪掉，将其剪成若干2-3cm的茎段，每个茎段上都保留1-2个侧芽；将茎段放在在洗衣粉溶液中浸泡，之后用清水冲洗，再用滤纸将茎段表面的水渍吸干；

S2、航天搭载前材料消毒处理

在无菌操作台内，将经过预处理的将茎段置于容器中，用75％酒精浸泡28-32s，再用无菌水冲洗，然后再用酸性氧化电位水或次氯酸钠溶液浸泡消毒，再次使用无菌水冲洗，最后用灭菌的滤纸吸干茎段表面多余的水分；

S3、航天搭载前材料接种处理

切去茎段的两端切口的毒害部分，切至茎段长度为1-2cm，茎段上端横切，茎段下端45°斜切，切好的茎段插入带有培养基的离心管中，插入时腋芽向上；

S4、航天搭载培养

将离心管转移至航天飞行器中封装，然后随航天飞行器发射升空，在太空环境下进行诱变，搭载期间材料的环境为暗培养；

S5、航天搭载返回后的恢复培养

在航天飞行器返回后隔离14d后尽快将茎段在无菌操作台内及时转接于恢复培养基中，并置于光照条件为400-800lx的弱光环境中培养48h后，转至光照条件为1200-2000lx和温度为24℃的环境中继续培养120h后，完成恢复培养。

2.如权利要求1所述的月季植物进行航天诱变育种的方法，其特征在于，还包括步骤：

S6、后续培养

包括以下培养方式中的一种或多种：

方式一、恢复培养完成后将腋芽从茎段上切下，并转接到增殖培养基中进行扩增繁殖，培养周期为43-47d，为后续的实验提供材料；

方式二、恢复培养完成后将腋芽从茎段上切下，并转接到生根培养基中培养14d，生根培养基中的月季试管苗长出3-5根幼嫩的根，将苗取出用清水将根部的培养基洗干净，种植于珍珠岩：蛭石：草灰土为1：1：1的混合基质中，置于温度为20℃、无阳光直射的环境条件中培养；

方式三、恢复培养完成后将茎段取出，形态学下端浸泡在生根剂中，浸泡30min后插入沙壤土：珍珠岩：蛭石为3：1：1基质中。

3.如权利要求2所述的月季植物进行航天诱变育种的方法，其特征在于，所述生根剂为100mg/LIBA+100mg/LNAA的生根剂。

4.如权利要求1所述的月季植物进行航天诱变育种的方法，其特征在于：步骤S1中所述茎段在洗衣粉溶液中浸泡时间为39-41min，然后用水冲洗1.8-2.2h。

5.如权利要求1所述的月季植物进行航天诱变育种的方法，其特征在于，步骤S2中两次的无菌水冲洗都是冲洗3-6遍。

6.如权利要求1所述的月季植物进行航天诱变育种的方法，其特征在于，步骤S2中酸性氧化电位水pH为2.3，氧化还原电位≥1100mv，有效氯浓度为100mg/L，浸泡时间为18-22min；次氯酸钠溶液的质量百分比为0.4％，浸泡时间为8-10min。

7.如权利要求1所述的月季植物进行航天诱变育种的方法，其特征在于，所述培养基为以下培养基中的一种：

MS+4.0mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA+0.4mg/L KT+2.0mg/L腺嘌呤+30g/L蔗糖+7.0g/L琼脂，pH5.8；

1/2MS+4.0mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA+0.4mg/L KT+2.0mg/L腺嘌呤+30g/L蔗糖+7.0g/L琼脂，pH5.8；

1/4MS+4.0mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA+0.4mg/L KT+2.0mg/L腺嘌呤+30g/L蔗糖+7.0g/L琼脂，pH5.8；

WPM+4.0mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA+0.4mg/L KT+2.0mg/L腺嘌呤+30g/L蔗糖+7.0g/L琼脂，pH5.8。

8.如权利要求1所述的月季植物进行航天诱变育种的方法，其特征在于，恢复培养基以下培养基中的一种：

MS+2.0mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA+30g/L蔗糖+7.0g/L琼脂，pH5.8；

WPM+2.0mg/L 6-BA+0.15mg/L IBA+30g/L蔗糖+7.0g/L琼脂，pH5.8。