[发明专利]血清拉曼光谱学在快速早期鉴别再生障碍性贫血和骨髓增生异常综合征中的应用

说明书

本发明提供一种基于拉曼光谱学的无需抗体标记、以及无需介入的AA和MDS的快速识别方法，所述方法以拉曼光谱的峰位强度的水平作为生物标志物在制备用于预测或检测血液病的产品中的应用。基于本发明的特异性和显著的拉曼位移作为生物标志物，对疾病的早期识别具有重要价值，也将提升疾病的诊断效率，降低检测成本，推动AA和MDS的快速和精准诊断工作进一步发展。

技术领域

本申请涉及医疗诊断领域，具体的为早期区分和/或检测再生障碍性贫血和骨髓增生异常综合征的标记。

背景技术

获得性骨髓衰竭综合征(bone marrow failure syndrome，BMF)是由于免疫功能异常或者造血干细胞质异常引起的一组骨髓造血障碍性疾病，在各年龄阶段均可发病。包括再生障碍性贫血(aplastic anemia，AA)、骨髓增生异常综合征(myelodysplasticsyndromes，MDS)、阵发性睡眠性血红蛋白尿症(paroxysmal nocturnal hemoglobinuria，PNH)、意义未明血细胞减少症(idiopathic cytopenia of undetermined significance，ICUS)和免疫相关性血细胞减少症(immunorelated pancgtopenia，IRP)等。

其中再生障碍性贫血AA是以骨髓造血细胞增生减低和外周血全血细胞减少为特征，在临床上， AA分为非重型AA(non-severe aplastic anemia，NSAA)、重型AA(severeaplastic anemia，SAA) 和极重型AA(very severe aplastic anemia，VSAA)等亚型，AA的传统检测手段主要包括血相和骨髓相检查及细胞学检查等。

骨髓增生异常综合征MDS表现为无效造血、难治性血细胞减少、造血功能衰竭，高风险向急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)转化。MDS临床上分为难治性贫血(refractory anemia， RA)、环形铁粒幼细胞性难治性贫血(RA with ringedsideroblasts，RAS)、难治性贫血伴原始细胞增多(RA with excess blasts，RAEB)和难治性贫血伴原始细胞增多转化型(RAEB in transformation， RAEB-t)等亚型，其中RAEB分为RAEB1和RAEB2，患者有发生骨髓衰竭和向AML转化的风险。MDS的传统检测手段主要包括血相和骨髓相检查、细胞遗传学检查、免疫学表型分析和基因分析等。MDS的诊断目前无“金标准”，为“除外性”诊断，由于其与MDS与AA的症状相似，临床以贫血、出血和感染为主要表现，因此MDS在与AA的鉴别诊断中需要多个平台检测结果的支撑。

拉曼光谱已被用于快速、无创和非标记鉴别血液系统疾病。Tsui等发现在1637、1585和1372cm^-1处的血红蛋白相关拉曼谱带在棘细胞和棘红细胞等异形细胞中的振幅较高，提示红细胞的生化异常。一些研究证明了拉曼光谱在从单克隆丙种球蛋白病(MGUS)到无症状骨髓瘤(aMM)和有症状骨髓瘤 (sMM)的过程中区分外泌体的能力，从而为患者护理提供了有用的临床指征。另一些研究表明MM亚型浆细胞与分化簇(CD45+/CD38+/CD138-)和(CD45-/CD38+/CD138+)之间存在一定程度的区别或相关性。基于对现有技术充分的理解，目前尚未有拉曼光谱应用于不同类型AA和MDS的血清分析的研究和应用，也缺乏结合AA和MDS患者的糖脂代谢相关的血清学指标的深入探讨。

同时难治性贫血型MDS极易和不典型再障相混淆，尤其是RAEB亚型，基于目前的检测方式一方面费时，另一方面由于检测项目复杂导致诊断成本较高，同时BMF的传统诊断方法所需的时间和经济成本较高并且需要采集骨髓样本进行诊断有侵入性，部分疾病类型尚无诊断“金标准”。因此开发一种成本低廉并且有助于早期识别BMF的诊断方法，在血液系统疾病诊断研究中具有重要的意义。

发明内容