[发明专利]双信号纳米探针及其在检测前列腺特异性抗原中的应用在审
| 申请号: | 202111451599.7 | 申请日: | 2021-12-01 |
| 公开(公告)号: | CN114295591A | 公开(公告)日: | 2022-04-08 |
| 发明(设计)人: | 李梦璐;冯宁翰;朱莎;冯杨焜;姜宇;郭玮 | 申请(专利权)人: | 无锡市第二人民医院 |
| 主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/31;B82Y15/00 |
| 代理公司: | 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 | 代理人: | 张丹锡 |
| 地址: | 214000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 信号 纳米 探针 及其 检测 前列腺 特异性 抗原 中的 应用 | ||
1.一种双信号纳米探针,其特征在于,所述双信号纳米探针为磷脂包裹的钙钛矿纳米粒子。
2.如权利要求1所述的纳米探针,其特征在于,所述磷脂为1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、阳离子脂质体用(2,3-二油酰基-丙基)-三甲基氯化铵、二油酰磷脂酰甘油或二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素。
3.一种制备权利要求1或2所述双信号纳米探针的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
分散步骤:将钙钛矿纳米粒子分散在有机溶剂中,得到分散液;
包裹步骤:将分散液和磷脂混合后在惰性气体中除去有机溶剂,得到固体产物;将混合液和缓冲液混合后进行超声,得到含有双信号纳米探针的反应液。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述分散液中,钙钛矿纳米粒子的浓度为0.6~0.8mM。
5.如权利要求3或4所述的方法,其特征在于,所述磷脂在分散液中的添加量为150~250μg/mL。
6.如权利要求3~5任一项所述的方法,其特征在于,所述混合液和缓冲液的混合体积比为1~3:5~10。
7.如权利要求3~6任一项所述的方法,其特征在于,所述缓冲液为PBS缓冲液、Tris缓冲液或醋酸钠缓冲液。
8.一种检测前列腺特异性抗原的方法,其特征在于,所述方法为使用权利要求1或2所述的双信号纳米探针对前列腺特异性抗原进行检测。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
固定步骤:将一抗添加至酶标板中进行孵育,得到固定有一抗的酶标板;
孵育步骤:先将样品添加至固定有一抗的酶标板中进行孵育,然后将链霉亲和素标记的二抗和生物素标记的权利要求1或2所述的双信号纳米探针添加至固定有一抗的酶标板中进行孵育,得到孵育产物;
一次检测步骤:检测孵育产物的荧光强度值后,根据测得的荧光强度值和荧光强度值与前列腺特异性抗原浓度之间的关系,计算得到样本中前列腺特异性抗原的浓度;
显色步骤:将显色底物TMB添加至孵育产物中进行显色,得到显色液;
二次检测步骤:检测显色液的吸光度值后,根据测得的吸光度值和吸光度值与前列腺特异性抗原浓度之间的关系,计算得到样本中前列腺特异性抗原的浓度。
10.权利要求1或2所述的双信号纳米探针或权利要求8或9所述的方法在检测前列腺特异性抗原中的应用。
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