[发明专利]一种改性聚合物微球、制备方法及其在固定化酶领域中的应用

权利要求书

1.一种改性聚合物微球的制备方法，其特征在于，包括：

将苯乙烯与马来酸酐发生自稳定沉淀聚合反应，经过洗涤、离心、干燥得到未改性聚合物微球；

将所述未改性聚合物微球与螯合配体超声分散于超干溶剂中，氮气保护下反应8 -12h；

加入过渡金属盐，马来酸酐的吸电子基团与过渡金属离子的摩尔比为1:(0.5~6)，室温下搅拌反应4 - 6h，透析24 - 48h后干燥得到改性聚合物微球；

螯合配体具有以下结构：

其中，R₁，R₂，R₃各自独立地为氢原子，羧基，吡啶、—CH₂COOH；

所述过渡金属盐为二水合氯化铜、无水硫酸铜、五水合硫酸铜、三水合硝酸铜、氯化锌、七水合硫酸锌、六水合氯化镍、六水合硫酸镍、六水合氯化钴或七水合硫酸钴中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的改性聚合物微球的制备方法，其特征在于，所述螯合配体与所述马来酸酐的摩尔比为1:(1.1~2)。

3.根据权利要求2所述的改性聚合物微球的制备方法，其特征在于，所述螯合配体与所述马来酸酐的摩尔比为1:(1.2~1.5)。

4.一种改性聚合物微球，其特征在于，是由权利要求1~3任意一项所述的改性聚合物微球的制备方法得到。

5.一种改性聚合物微球选择性固定化酶的方法，其特征在于，将权利要求4所述的改性聚合物微球或者通过权利要求1~3任一项所述的制备方法得到的改性聚合物微球，与酶溶液混合后，通过搅拌或者振荡，在4-30 ℃下固定化；所述酶上含有组氨酸残基组成的His标签。

6.根据权利要求5所述的改性聚合物微球选择性固定化酶的方法，其特征在于所述酶是 蛋白酶，所述蛋白酶包括单酶或多酶体系。

7.根据权利要求6所述的改性聚合物微球选择性固定化酶的方法，其特征在于所述蛋白酶是 自身含有His标签的酶，或者自身不含有His标签的酶，所述自身不含His标签的酶需要通过基因重组技术将His标签插入N端或者C端。