[发明专利]一种高效粗品肝素钠收率实验方法

权利要求书

1.一种高效粗品肝素钠收率实验方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、酶解/酸处理：取粗品肝素钠，加入纯化水搅拌至完全溶解，调节料液pH，水浴加热，加入蛋白水解酶进行酶解，酶解完成后，将料液煮沸；煮沸后降低料液温度，调节料液pH，产生大量沉淀，利用离心机低温离心，取上清液，调节其pH；

S2、氧化：对步骤S1中得到的料液进行升温，并加入过氧化氢进行氧化，氧化完成后离心并收集上清液，对离心得到沉淀进行洗涤，再次离心，合并上清液；

S3、沉淀：调节步骤S2得到的料液的pH至中性，稀释后加入氯化钠，升高温度，加入乙醇并搅拌均匀，降温沉淀；

S4、精制：步骤S3沉淀完成后，弃去上清液及上层絮状沉淀物，取底层沉淀物加乙醇研磨，抽滤，干燥，收集样品封装，称重。

2.根据权利要求1所述的一种高效粗品肝素钠收率实验方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、酶解/酸处理：取粗品肝素钠，加入纯化水，溶解成浓度为10％的料液，搅拌至完全溶解，调节料液pH至6.0-7.0，水浴加热至50℃，加入0.4-0.6g蛋白水解酶进行酶解，保温2h，酶解完成后，将料液煮沸，煮沸时间为5min；煮沸后降低料液温度，取出料液，调节料液pH，产生大量沉淀，利用离心机低温离心，取上清液，用氢氧化钠溶液调节其pH至9.0-10.0；

S2、氧化：对步骤S1中得到的料液进行升温，将温度升至28℃，并加入料液体积1.0％的过氧化氢进行氧化，氧化8h；氧化完成后离心并收集上清液，利用纯化水对离心得到沉淀进行洗涤，再次离心，合并上清液；

S3、沉淀：调节步骤S2得到的料液的pH至中性，稀释后加入氯化钠，升高温度至60℃，加入乙醇并搅拌均匀，降温至4℃，沉淀8h；

S4、精制：步骤S3沉淀完成后，弃去上清液及上层絮状沉淀物，取底层沉淀物加乙醇研磨，抽滤，干燥，收集样品封装，称重。

3.根据权利要求1所述的一种高效粗品肝素钠收率实验方法，其特征在于，步骤S1中，料液温度降至4-6℃时，在搅拌状态下将料液的pH值调节至1.2-1.5。

4.根据权利要求1所述的一种高效粗品肝素钠收率实验方法，其特征在于，步骤S1中低温离心的条件为：转速4000rad/min，温度0-4℃，时间5min；步骤S2中两次进行离心的条件均为：转速4000rad/min，时间10min。

5.根据权利要求1所述的一种高效粗品肝素钠收率实验方法，其特征在于，步骤S3中所用乙醇为药用乙醇，加入量为料液体积的0.46倍。

6.根据权利要求1所述的一种高效粗品肝素钠收率实验方法，其特征在于，步骤S4中干燥的条件为：干燥温度60℃，干燥时间3-5h。

7.根据权利要求1所述的一种高效粗品肝素钠收率实验方法，其特征在于，用于表征粗品肝素钠质量的评定指标包括效价、分子量和效价收率。