[发明专利]用于直接检测蚕丝丝胶蛋白的多肽抗体及制备方法及应用有效
| 申请号: | 202111158475.X | 申请日: | 2020-06-19 |
| 公开(公告)号: | CN113861290B | 公开(公告)日: | 2023-06-16 |
| 发明(设计)人: | 刘春;张轩;程廷才 | 申请(专利权)人: | 西南大学 |
| 主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;G01N33/68;G01N33/535 |
| 代理公司: | 成都九鼎天元知识产权代理有限公司 51214 | 代理人: | 刘磊 |
| 地址: | 400715*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 直接 检测 蚕丝 丝胶 蛋白 多肽 抗体 制备 方法 应用 | ||
1.一种用于直接检测蚕丝丝胶蛋白2的多克隆抗体,其特征在于:其抗原包括多肽五,其中多肽五的氨基酸序列为SEQ ID NO.5所示。
2.根据权利要求1所述的一种用于直接检测蚕丝丝胶蛋白2的多克隆抗体,其特征在于:其抗原还包括多肽一、多肽二、多肽三、多肽四、多肽六和多肽七中至少一种,多肽一的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示,多肽二的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示,多肽三的氨基酸序列为SEQ ID NO.3 所示,多肽四的氨基酸序列为SEQ ID NO.4所示,多肽六的氨基酸序列为SEQ ID NO.6所示,多肽七的氨基酸序列为SEQ ID NO.7所示。
3.根据权利要求1所述的一种用于直接检测蚕丝丝胶蛋白2的多克隆抗体的制备方法,其特征在于:将多肽五与KLH偶联作为免疫抗原、PBS将免疫抗原分别稀释、抗原加入福氏不完全佐剂并乳化注射、小动物血液离心和抗体纯化步骤。
4.根据权利要求3所述的一种用于直接检测蚕丝丝胶蛋白2的多克隆抗体的制备方法,其特征在于:所述PBS的贮存液(10×)配法:
NaCl 8.5g,
KCl 0.2g,
Na2HPO4•12H2O 2.85g,
KH2PO4 0.27g;
其中2.85g的Na2HPO4•12H2O或为1.13g的Na2HPO4•2H2O,将上述原料溶于100ml去离子水中,调节pH值至7.2。
5.根据权利要求3所述的一种用于直接检测蚕丝丝胶蛋白2的多克隆抗体的制备方法,其特征在于:所述抗体纯化步骤后还有免疫分析步骤,其中加入二抗中时再次进行酶标记。
6.根据权利要求5所述的一种用于直接检测蚕丝丝胶蛋白2的多克隆抗体的制备方法,其特征在于:所述酶标记中酶为辣根过氧化物酶。
7.根据权利要求1所述的一种用于直接检测蚕丝丝胶蛋白2的多克隆抗体的应用,其特征在于:所述蚕丝丝胶蛋白2的多克隆抗体在制备检测蚕丝丝胶蛋白2的试剂盒中的应用。
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