[发明专利]一种葫芦单倍体胚诱导的方法

权利要求书

1.一种葫芦单倍体胚诱导的方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)播种育苗：取不同葫芦品种的种子进行烫种、浸泡、催芽，待种子露白后育苗；

(2)移栽定植：当苗的第一片真叶完全展平、第二片真叶露心时进行移栽；

(3)对雄花进行辐射处理：用C₀⁶⁰γ辐射源对雄花进行花粉辐射，辐射后的雄花冷藏保存；

(4)辐射花粉的贮藏活力测定：对花粉进行萌发率测定，花粉萌发率等于同一视野时花粉萌发数占花粉总粒数的百分比；

(5)辐射花粉授粉：在雄花经过辐射处理后，同天或第二天对将要开放的雌花进行授粉。需提前一天套袋，以防串粉，用2-3朵辐射雄花涂抹一朵雌花的柱头；

(6)果实采摘和灭菌；

(7)不同培养基诱导离体胚：统计不同诱导培养基的种子萌发成苗率；

(8)再生苗的增殖、生根和驯化移栽：统计移栽植株的成活率；

(9)倍性鉴定：以葫芦二倍体植株为对照，对再生植株进行鉴定，结合田间的植株性状观察验证其倍性；

(10)染色体加倍，获得双单倍体后代。

2.根据权利要求1所述的葫芦单倍体胚诱导的方法，其特征在于：所述步骤(1)中催芽期定期对种子进行淘洗，并检查种子露白情况。

3.根据权利要求1所述的葫芦单倍体胚诱导的方法，其特征在于：所述步骤(2)辐射剂量为50-150Gy。

4.根据权利要求1所述的葫芦单倍体胚诱导的方法，其特征在于：所述步骤(3)花粉管长度超过花粉直径0.5倍的花粉即为萌发粉粒。

5.根据权利要求1所述的葫芦单倍体胚诱导的方法，其特征在于：所述步骤(5)授粉后将雌花花冠套袋，防止串粉或再次授粉。

6.根据权利要求1所述的葫芦单倍体胚诱导的方法，其特征在于：所述步骤(7)培养条件为25±2℃，光强2500-3000lx。

7.根据权利要求1所述的葫芦单倍体胚诱导的方法，其特征在于：所述步骤(9)鉴定方法包括幼嫩卷须染色体计数、流式细胞仪鉴定或叶片保卫细胞叶绿体数目观察。