[发明专利]一种制备用于棉花胚珠空间转录组分析的切片的方法

权利要求书

1.一种制备用于棉花胚珠空间转录组分析的切片的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)取新鲜棉花胚组织，修剪成合适大小的组织块，清洗干净并吸干水分，置于培养皿中；

2)将在冰上预冷后的OCT注入包埋盒，加入量不超包埋盒1/3，确认组织切片方向，使用镊子将新鲜组织放入装有OCT的包埋盒中，再用OCT覆盖暴露的组织表面，确认在组织附近没有气泡，立即将含有组织和OCT的包埋盒放在干冰上或-80℃冰箱中冷冻30min，直至OCT完全冻结，

3)切片：OCT完全冻结后进行切片，将样品托固定到冰冻切片机的预冷样品托持承器上，进行切片，切片厚度为8-10μm；冰冻切片机预冷至-20℃，样品托持承器温度预冷至-20℃,

4)制片：将切片平展于速冻台上，调整切片的角度，将切片贴在空间转录组专用的玻片上，得到用于棉花胚珠空间转录组分析的切片。

2.根据权利要求1所述的制备用于棉花胚珠空间转录组分析的切片的方法，其特征在于，在步骤1)中，修剪棉花胚组织的大小为6.5mm×6.5mm。

3.根据权利要求1所述的制备用于棉花胚珠空间转录组分析的切片的方法，其特征在于，还包括步骤：通过HE染色确定目标区域，然后进行RNA质检。