[发明专利]一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成骨的方法在审
| 申请号: | 202110103756.9 | 申请日: | 2021-01-26 |
| 公开(公告)号: | CN112725265A | 公开(公告)日: | 2021-04-30 |
| 发明(设计)人: | 朱灏 | 申请(专利权)人: | 朱灏 |
| 主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;C12N5/0775 |
| 代理公司: | 上海微策知识产权代理事务所(普通合伙) 31333 | 代理人: | 张静 |
| 地址: | 214000 江苏省无锡*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 高效率 人间 干细胞 诱导 化成 方法 | ||
1.一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成骨的方法,其特征在于,具体步骤包括:
S1.MM3培养基的制备;
S2.增扩培养;
S3.定向诱导分化;
S4.诱导分化后细胞鉴定。
2.根据权利要求1所述的一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成骨的方法,其特征在于,所述MM3培养基的原料包括营养成分和间充质干细胞无血清基础培养基。
3.根据权利要求2所述的一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成骨的方法,其特征在于,所述营养成分和间充质干细胞无血清基础培养基的体积比为1:(17-23)。
4.根据权利要求1所述的一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成骨的方法,其特征在于,所述增扩培养的操作条件为:使用孔板以4-9×104/孔的密度接入人间充质干细胞。
5.根据权利要求1所述的一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成骨的方法,其特征在于,所述增扩培养的培养条件为:置于36-38℃,4-6%CO2培养箱中培养。
6.根据权利要求1所述的一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成骨的方法,其特征在于,所述定向诱导分化的条件为:置于36-38℃,4-6%CO2培养箱中培养,定期更换成骨分化培养试剂。
7.根据权利要求1所述的一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成骨的方法,其特征在于,所述S2步骤中增扩培养的时间为20-56h。
8.根据权利要求1所述的一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成骨的方法,其特征在于,所述S2步骤中增扩培养的时间为24-46h。
9.根据权利要求1所述的一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成骨的方法,其特征在于,所述S3步骤中诱导分化培养的时间为15-21天。
10.一种根据权利要求1-9所述的高效率的人间充质干细胞诱导分化成骨的方法的应用,其特征在于,该方法应用于骨髓间充质干细胞、脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、胎盘间充质干细胞、羊膜间充质干细胞的诱导分化成骨。
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