[发明专利]制备用于T细胞疗法的T细胞的方法

权利要求书

1.一种用于增加细胞群体中干记忆T细胞的百分比的方法，所述方法包括：

a)以一定体积比使一定体积的抗-CD3/CD28纳米基质与一定体积的起始细胞群体接触，其中，

i)所述起始细胞群体是在至少约0.2x 10⁶个细胞/ml至约5.8x 10⁶个细胞/ml的细胞密度；并且

ii)所述体积比是1体积的抗-CD3/CD28纳米基质:17.4体积或更少的起始细胞群体；和

b)在培养基中培养所述细胞群体，

其中得到的T细胞群体包含与第二T细胞群体相比增加的干记忆T细胞百分比，其中以一体积的抗-CD3/CD28纳米基质:17.5或更多体积的第二起始细胞群体的比例使相同细胞密度的第二起始细胞群体与抗-CD3/CD28纳米基质接触。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述起始细胞群体得自外周血、骨髓、淋巴结组织、脐带血、胸腺组织、来自感染部位的组织、腹水、胸腔积液、脾组织、肿瘤、间质组织、T细胞系、诱导的多能干细胞或人工胸腺类器官(ATO)细胞培养系统。

3.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述起始细胞群体选自T淋巴细胞、B淋巴细胞、辅助性T细胞、肿瘤浸润性淋巴细胞、记忆T细胞、细胞毒性T细胞、天然杀伤T细胞、外周血淋巴细胞、肿瘤浸润性白细胞、外周血单核细胞、树突细胞、脐带血干细胞、多能干细胞和间质干细胞。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述起始细胞群体是外周血单核细胞(PBMC)、阳性选择的CD3、CD4或CD8 T细胞或阴性选择的CD3、CD4或CD8 T细胞或它们的组合。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述起始细胞群体是外周血单核细胞。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述起始细胞群体是包含CD4⁺和/或CD8⁺T细胞的纯化的T细胞群体。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中起始细胞密度是至少约0.50x 10⁶至约6.00x 10⁶、约0.56x 10⁶至约5.72x 10⁶、约0.80x 10⁶至约4.0x 10⁶、约1.00x 10⁶至约3.0x10⁶、约2.00x 10⁶至约3.5x 10⁶或约2.50x 10⁶至约3.5x 10⁶。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞密度是约2.86x 10⁶个细胞/ml。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中起始细胞密度是约1.50x 10⁶个细胞/ml。

10.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中起始细胞密度是至少约0.28x 10⁶至约2.86x 10⁶、0.25x 10⁶至约2.00x 10⁶、约0.5x 10⁶至约2.00x 10⁶、约1.00x 10⁶至约2.00x10⁶、约0.80x 10⁶至约1.5x 10⁶或约1.20x 10⁶至约1.5x 10⁶个细胞/ml。

11.根据权利要求1至7或10中任一项所述的方法，其中所述细胞密度是约1.43x 10⁶个细胞/ml。