[发明专利]电致化学发光免疫传感器

权利要求书

1.一种增强Ru(bpy)₃²⁺电致化学发光信号的复合物AgNPs:GSH，其特征在于：

所述复合物为纳米银AgNPs与还原型谷胱甘肽GSH的复合物。

2.如权利要求1所述的复合物AgNPs:GSH，其特征在于：

该复合物的制备方法为：

AgNPs与GSH混合后在2~8℃充分反应，即得；优选地，反应温度为4℃；

和/或，AgNPs与GSH的物质的量之比为1.07:100 ~ 1.07:1800；优选地，为1.07:200。

3.一种电致化学发光免疫传感器，其特征在于：它自下而上包括：电极、石墨烯层、银单质层，银单质层上表面吸附Ru(bpy)₃²⁺，Ru(bpy)₃²⁺则进一步吸附权利要求1或2所述复合物AgNPs:GSH，AgNPs:GSH通过Ag与诱饵蛋白结合；

所述诱饵蛋白为抗原或抗体，用于免疫结合待检测的抗体或抗原。

4.如权利要求3所述的传感器，其特征在于：在未与诱饵蛋白结合的AgNPs:GSH的Ag结合有封闭剂；优选地，所述封闭剂是BSA。

5.一种电致化学发光免疫传感器的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）均匀地在电极表面涂抹石墨烯，干燥后，形成石墨烯层；

（2）在石墨烯层表面覆盖银单质；

（3）在Ru(bpy)₃²⁺溶液中使银单质表面吸附Ru(bpy)₃²⁺；

（4）在Ru(bpy)₃²⁺表面修饰权利要求1或2所述的复合物AgNPs:GSH；

（5）在复合物AgNPs:GSH的银颗粒上修饰抗原或抗体。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述步骤（2）为通过电沉积将银离子转化为银单质，覆盖到石墨烯层表面；

优选地，银离子浓度10 mmol/L，电沉积电位-0.2 V，时间100s。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述步骤（3）中吸附时间为8min；

和/或，Ru(bpy)₃²⁺溶液中Ru(bpy)₃²⁺浓度为1 mmol/L。

8.一种检测蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）将待检样本加到权利要求3或4所述传感器上孵育，如果样本中含有目标蛋白，则目标蛋白与诱饵蛋白免疫结合；

2）洗涤未免疫结合的蛋白；

3）将传感器置于缓冲液中，用电化学发光分析仪测定发光信号。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于：所述缓冲液的pH为8。