[发明专利]WWP1在胰腺癌中的应用

说明书

本发明涉及基于WWP1的胰腺癌检测、预后情况判断的试剂以及WWP1阻断剂在治疗胰腺癌中的应用。具体地，本发明提供一种通过检测WWP1基因，从而检测胰腺癌的检测试剂及含所述试剂的试剂盒。此外，本发明还提供了WWP1阻断剂，优选为WWP1 ShRNA，在制备治疗和/或预防和/或缓解由胰腺癌引起的相关疾病的药物中的用途。

技术领域

本发明涉及医药生物技术领域，具体基于WWP1的胰腺癌检测、预后试剂以及WWP1阻断剂在治疗胰腺癌中的应用

背景技术

胰腺导管腺癌(PDAC)是目前恶性程度最高的恶性肿瘤之一，也是全世界主要的致死癌症之一，估计每年导致227,000患者死亡。通常诊断时已发展为晚期，只有低于20％的胰腺癌可以手术切除；40％呈现局部侵润，无法手术切除病灶；剩余的病人诊断时已出现病灶转移。并且胰腺癌对常规化疗、放疗不敏感(1，2)。目前的治疗方案无法明显延长患者的生命，并且临床治疗结果在过去的35年里没有大幅改进，总体5年生存率在5％左右，大部分晚期患者平均生存期不到一年(2，3)。胰腺癌的早期转移是其主要的致命原因。有证据表明，这一过程可能是通过肿瘤干细胞CSCs来实现的，并且这类细胞具有上皮间质转化(EMT)的特性(4)。

WWP1属于NEDD4样家族的E3泛素连接酶，分布广泛，由其参与构成的蛋白在RNA转录和加工，蛋白运输和稳定，细胞骨架调控等多种细胞生化过程中广泛存在。研究表明WWP1在许多肿瘤的发生、发展、进展和预后中发挥重要作用，包括肝癌(17)、口腔癌(18)、前列腺癌(19)和乳腺癌(20)等。

研究发现相对于正常胃组织，胃癌中WWP1的mRNA和蛋白表达水平均显著提高，并且这与胃癌病人的肿瘤分化程度、TNM分期、亲润深度和淋巴转移密切相关(21)。

一项来自肝癌的研究表明，WWP1蛋白在肝癌中的表达水平显著高于非癌组织，同时，其mRNA的表达水平在所研究的7例肝癌组织中也显著上升(17)。

LinJH等(18)研究表明，WWP1在口腔癌标本和6个口腔癌细胞系中表达量上调。

WWP1的mRNA和蛋白表达在前列腺癌和乳腺癌中也是经常上调(19，20)。在之前的研究报道中发现人类乳腺癌组织中已经有泛素连接酶E3的基因突变，如Md2(22)，EPF(23)，Skp2(24)和β-TrCP(22)等。泛素连接酶E3已报道在人乳腺癌中具有致癌作用。WWP1作为另一泛素连接酶E3，基因组频繁发生和放大表达，它在乳腺癌的发病机制中起重要作用，被认为是潜在致癌基因(25，26，27)。

在上述肿瘤发生过程中，WWP1调控许多重要的蛋白，它是通过TGF-β受体调节TI3R1(28)通路，以及Smad2(29)和Smad4(30)的泛素介导的逆向蛋白质降解的转变调节因子信号通路。此外，WWP1还可以调节钠离子通道(ENaC)(31)，Runx2(32),Notch(33),KLF5(34)和KLF21(35)中的上皮细胞中的表达。其中，KLF5是一种肿瘤抑制基因，并且下调KLF2可以提高在乳腺致癌物c-myc的转录水平，在乳腺癌的生长和转移KLF2和KLF5表达起着重要的作用。

研究表明NEDD4作为PTEN作用的特殊的E3连接酶，能通过多聚泛素化作用降解PTEN的水平(36，37)和促进Akt信号途径的活化(38)，此外，研究证明，PTEN-Akt信号途径是原癌基因信号途径的关键调节因子(39)，可能成为许多肿瘤干预的分子靶点(40)。作为NEDD4样家族的一员，WWP1在肿瘤的发生发展中具有十分重要的作用，因而可能成为肿瘤基因治疗的新的分子靶点，而目前尚未有WWP1应用在胰腺肿瘤中的报道。

因此在胰腺肿瘤治疗的领域中，迫切需要开发基于WWP1的胰腺肿瘤的检测以及预后的试剂或试剂盒，并且研究WWP1阻断剂在治疗胰腺肿瘤中的应用。

发明内容