[发明专利]一种通过病毒荧光蛋白表达检测材料抗病毒性能的方法

说明书

本发明公开了一种简单、方便观察的抗病毒材料的检测方法。将绿色荧光蛋白(GFP)或者其他荧光蛋白的基因克隆在病毒中制备重组病毒。材料与具有荧光基因的病毒孵育后，收集病毒液感染细胞，通过检测细胞GFP或者其他荧光蛋白的表达情况，鉴定病毒的感染能力。如果材料能灭活病毒，病毒不能感染细胞，故无GFP或其他荧光蛋白在细胞中表达，细胞不显示荧光；如果材料不能灭活病毒，则病毒能感染细胞，GFP或其他荧光蛋白在细胞中表达，细胞显示荧光。该方法简单、方便地观察材料抗病毒性能。

技术领域

本发明属于材料检测领域，涉及材料抗病毒性能的检测，具体涉及一种通 过病毒荧光蛋白表达检测材料抗病毒性能的方法。

背景技术

病毒一直是威胁人类健康的主要病原体。抗病毒材料在预防和控制病毒传 播感染中具有重要的作用。

抗病毒材料的检测方法通常将材料与病毒孵育后，通过病毒空斑实验进行 检测，但是操作过程相对复杂。

发明内容

为了简化材料抗病毒性能的检测方法，本发明提供了一种简单、方便观察 的材料抗病毒性能的检测方法。本发明通过具有荧光蛋白基因的重组病毒与材 料作用后，是否能够感染细胞，通过观察细胞的荧光表达状态，从而判断材料 灭活病毒效果的检测方法。

为达到以上目的，本发明是采取如下技术方案予以实现：

一种通过病毒荧光蛋白表达检测材料抗病毒性能的方法，包括以下步骤：

测试具有荧光蛋白基因的病毒感染细胞的最适感染复数；

将适当体积的病毒与待检测材料孵育一段时间；

收集孵育后的病毒液，并感染细胞；

细胞感染后，通过荧光显微镜观察细胞是否表达荧光蛋白：

若荧光蛋白不表达，说明病毒不能感染细胞，待检测材料具有灭活病毒的 性能；

若荧光蛋白表达，说明病毒能感染细胞，待检测材料不具有灭活病毒的性 能。

所述待检测材料为固体或液体；

若待检测材料为固体形态，将病毒滴加到待检测材料表面后，盖上盖玻片 孵育；若待检测材料为液体形态，将病毒与液体待检测材料在试管中直接孵育 一段时间。

所述固体待检测材料孵育后用无血清培养基润洗后收集孵育后的病毒液。

孵育时，所述病毒的体积＝细胞数×最适感染复数/病毒滴度。

所述待检测材料在孵育前需进行消毒处理。

与现有技术相比，本发明具有以下技术效果和优点：

与传统的病毒空斑实验相比，本发明将绿色荧光蛋白(GFP)或者其他荧 光蛋白的基因克隆在病毒中制备重组病毒。具有荧光基因的病毒与材料孵育后 感染细胞，通过检测细胞GFP或者其他荧光蛋白的表达情况，鉴定病毒是否被 灭活。如果材料能灭活病毒，病毒不能感染细胞，故无GFP或其他荧光蛋白在 细胞中表达，细胞不显示荧光；如果材料不能灭活病毒，则病毒能感染细胞，GFP或其他荧光蛋白在细胞中表达，细胞显示荧光。本发明是一种简单、方便 观察的材料抗病毒性能的检测方法。

附图说明

图1是本发明的实施例1、2、3材料与病毒孵育后，通过检测被病毒感染 细胞的荧光状态而判断材料抗病毒性能的示意图；

图2是本发明的实施例1的实验结果分析；(a)为腺病毒，(b)为慢病 毒；

图3是本发明的实施例2的实验结果分析；(a)为腺病毒，(b)为慢病 毒；

图4是本发明的实施例3的实验结果分析；(a)为腺病毒，(b)为慢病 毒。