[发明专利]一种新型冠状病毒IgGIgM抗体联合检测试剂制备方法

权利要求书

1.一种新型冠状病毒IgGIgM抗体联合检测试剂制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

S1、用磷酸盐缓冲液将鼠抗人IgM单克隆抗体稀释到包被浓度为2.0至5.0mg/ml；

将鼠抗人IgG单克隆抗体稀释到包被浓度为1.0至3.0mg/ml；

将鼠抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)N抗原抗体稀释成包被浓度为1.0至5.0mg/ml；

用金标划线机将三种包被液划到硝酸纤维素膜上，分别标记T1、T2和C；

然后干燥后即获得划线硝酸纤维素膜，进行干燥并储存备用；

S2、将标记浓度为30至50μg/ml的重组新型冠状病毒(SARS-CoV-2)N抗原与胶体金进行偶联制得胶体金标记的复合物，以转速为10000转/分钟离心20分钟，弃上清；

然后加入胶体金结合物稀释液至原体积的80％，然后用稀释液按50μl/cm2浸泡涂抹玻璃纤维素膜制成金标垫，进行干燥并储存备用；

S3、将划线硝酸纤维素膜、金标垫、吸水纸、样品垫装配成反应板，再用切条机切成3至4mm的试纸条，装卡后，装入铝箔袋内制成检测试剂。

2.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒IgGIgM抗体联合检测试剂制备方法，其特征在于：S1至S3步骤中，硝酸纤维素膜、金标垫和抗原垫的制备中干燥条件为37℃干燥3小时。

3.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒IgGIgM抗体联合检测试剂制备方法，其特征在于：S1步骤中，用人源化的鼠抗人IgM单克隆抗体和人源化的鼠抗人IgG单克隆抗体划检测线T1/T2。

4.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒IgGIgM抗体联合检测试剂制备方法，其特征在于：所述检测线T1以包被浓度为2.0mg/ml的人源化鼠抗人IgM单克隆抗体划线；

所述检测线T2以包被浓度为1.4mg/ml的人源化鼠抗人IgG单克隆抗体划线；

所述质控线以包被浓度为1.2mg/ml的鼠抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)N抗原抗体划线；

所述胶体金标记的重组新型冠状病毒(SARS-CoV-2)N抗原的标记浓度为30μg/ml。

5.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒IgGIgM抗体联合检测试剂制备方法，其特征在于：所述胶体金的制备方法为，在100ml双蒸水中加入1％氯金酸溶液1.0ml煮沸，在搅拌条件下加入1.6ml的1％柠檬酸三钠溶液，继续煮沸5分钟，冷却至室温备用。

6.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒IgGIgM抗体联合检测试剂制备方法，其特征在于：所述胶体金标记重组新型冠状病毒(SARS-CoV-2)N抗原的pH为9.0～9.4；重组新型冠状病毒(SARS至CoV至2)N抗原浓度为30μg/ml；

胶体金标记重组新型冠状病毒(SARS至CoV至2)N抗原稀释比例为1:0.8；

金标垫的制备条件为稀释后的胶体金结合物按50μl/cm2浸泡涂抹。