[发明专利]一种血虚小鼠模型的构建及评价方法

说明书

本发明属于模型的评价方法技术领域，具体为一种血虚小鼠的模型构建方法及评价方法。主要解决现有血虚模型的评价方法存在精确性低、专属性差的技术问题。本发明采用代谢组学技术，分析空白对照组与模型组小鼠脾脏中内源性代谢产物的变化，通过CD软件对所有质谱谱图进行处理得到积分数据，并结合15个生物标志物的含量统计学分析空白对照组与模型组小鼠脾脏中的生物标志物的积分均值变化趋势，得出血虚小鼠脾脏代谢物含量的变化趋势，从而针对性的评价血虚小鼠的模型。本发明体现出模型复制的合理性和科学性，系统综合的表现出空白对照组与模型组小鼠机体轮廓，具有全面系统、高效、特异性强的优点，为新药研发和药理研究提供可靠的评价方法。

技术领域

本发明属于模型的构建及评价方法技术领域，具体涉及一种血虚小鼠模型的构建及评价方法。

背景技术

血虚是中医临床常见证候，是指机体血液不足、营养功能低下，致使脏腑组织濡养不足的病理状态。传统中医认为血虚形成的原因主要包括失血过多，或久病阴血虚耗，或脾胃功能失常，水谷精微不能化生血液等。

现代药理学研究中，常采用放血、化学性损伤、放射性损伤等手段建立血虚证动物模型。目前判断血虚模型复制成功与否主要是根据血常规指标、脏器指数、股骨病理切片等指标。多数研究人员也会检测骨髓有核细胞、网织红细胞等相关造血功能指标。

但在长期以往的实验研究中，血虚模型评价仍存在以下不足之处。(1)主观性：股骨组织形态直接观察指标包括造血细胞的松散度、红细胞和巨噬细胞的含量等，这种评价方法主要是主观人为评价，存在很大的主观性和不确定性。(2)片面性：通过血虚相关造血功能指标评价模型存在一定的片面性，只能反映个别器官或组织的状态和生化功能，缺乏整体的，系统的评价标准。(3)专属性差：几乎所有血虚疾病包括心血虚、肝血虚等血虚病症的红细胞(RBC)和白细胞(WBC)指标均发生改变，不具备专属性。

发明内容

为了解决现有血虚模型的评价方法精确性低、专属性差的技术问题，本发明提供一种血虚小鼠模型的评价方法。

为解决本发明的技术问题，所采用的技术方案为：

一种血虚小鼠模型的构建方法，包括以下步骤：第一天对小鼠皮下注射20mg/kg的乙酰苯肼，第四天早上对小鼠皮下注射10mg/kg的乙酰苯肼，两个小时之后对小鼠腹腔注射20mg/kg的环磷酰胺，第四天到第七天对小鼠腹腔注射20mg/kg的环磷酰胺，即获得血虚小鼠模型。与其他方法相比，该方法用小鼠构建血虚模型，操作简单、成本低廉、周期短、成功率高、病理改变稳定，可重复性强，具备突出的实质性特点，与临床血虚病症更为一致。

一种血虚小鼠模型的评价方法，包括以下步骤：通过空白对照组与模型组小鼠脾脏中内源性代谢产物的变化来评价。机体免疫失衡是血虚症发生的重要病因之一。脾脏作为血虚小鼠免疫系统紊乱的靶器官，更可以直接反映血虚疾病的生物功能紊乱。尤其是针对内源性代谢物的变化，更可以灵敏地揭示血虚小鼠的机体状态。

进一步地，所述的空白对照组小鼠，具体构建方法为：第一天对小鼠皮下注射20mg/kg的无菌水，第四天早上对小鼠皮下注射10mg/kg的无菌水，两个小时之后对小鼠腹腔注射20mg/kg的无菌水，第四天到第七天对小鼠腹腔注射20mg/kg的无菌水，即获得空白对照组小鼠模型。平行采用无菌水灌胃实验小鼠，有利于模拟与血虚小鼠复制的细节，克服灌胃行为对机体的干扰，能更加准备地进行与模型小鼠的差异比较。