[发明专利]一种血虚小鼠模型的构建及评价方法有效
| 申请号: | 201910905427.9 | 申请日: | 2019-09-24 |
| 公开(公告)号: | CN110583573B | 公开(公告)日: | 2020-08-04 |
| 发明(设计)人: | 秦雪梅;李鑫琦;刘月涛 | 申请(专利权)人: | 山西大学 |
| 主分类号: | A01K67/02 | 分类号: | A01K67/02;G01N27/62;G01N33/50 |
| 代理公司: | 太原申立德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14115 | 代理人: | 程园园 |
| 地址: | 030006*** | 国省代码: | 山西;14 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 血虚 小鼠 模型 构建 评价 方法 | ||
1.一种血虚小鼠模型的评价方法,其特征在于:通过空白对照组与模型组小鼠机体脾脏中内源性代谢产物的变化来评价,具体为:在小鼠模型构建完成后,收集空白对照组小鼠与模型组小鼠的脾脏分别进行质谱分析,得出空白对照组与模型组小鼠的质谱谱图;分析空白对照组小鼠与模型组小鼠机体脾脏中内源性代谢产物的变化,使用CompoundDiscover软件对所有的质谱谱图进行处理得到积分数据,然后对空白对照组与模型组小鼠的质谱谱图积分数据矩阵进行多元统计分析,得出小鼠模型的轮廓图;对小鼠模型的轮廓图进行轮廓动态分析,得出小鼠模型的轮廓动态变化趋势图;进而采用主成分分析法对数据进行模式识别,得出生物标志物的含量变化,结合小鼠模型的动态轮廓变化趋势图和生物标志物的含量统计学分析,评价血虚小鼠模型是否构建成功;
所述的生物标志物为15个,分别为:4-Indolecarbaldehyde、Acetyl-L-carnitine、Azelnidipine、Cytarabine、Cytidine 5'-monophosphate(hydrate)、Cytosine、Deoxyadenosine monophosphate、L-Tryptophan、L-Glutathione oxidized、N(6)-Methyladenosine、N-Acetyl-D-galactosamine 4-sulfate、N-Acetyl-L-glutamic acid、Uracil、Uric acid和Xanthosine。
2.根据权利要求1所述的一种血虚小鼠模型的评价方法,其特征存在于:所述15个生物标志物获取的具体方法为:首先分析得出的空白对照组与模型组的主成分分析法图,即PCA图;然后,观察PCA图,空白对照组与模型组能够显著分开,表明血虚小鼠模型造模成功;在PCA的基础上,利用正交偏最小二乘-判别分析法对正常对照组和模型组小鼠脾脏进一步分析,得到与正常对模型组小鼠脾脏轮廓图,通过载荷图对变量加载结果进行描述,利用变量重要性分析,S-plot相关性>0.58并结合统计学p<0.05获得潜在的生物标志物,从对照组与模型组中找到含量变化差异显著的变量,然后对空白对照组与模型组小鼠脾脏进行质谱分析得出质谱图谱进行积分,得出15个生物标志物的含量变化。
3.根据权利要求1所述的一种血虚小鼠模型的评价方法,其特征存在于:所述的空白对照组小鼠,具体构建方法为:第一天对小鼠皮下注射20mg/kg的无菌水,第四天早上对小鼠皮下注射10mg/kg的无菌水,两个小时之后对小鼠腹腔注射20mg/kg的无菌水,第四天到第七天对小鼠腹腔注射20mg/kg的无菌水,即获得空白对照组小鼠模型。
4.根据权利要求1-3任一项所述的一种血虚小鼠模型的评价方法,其特征在于:所述的15个生物标志物的含量变化为:
Acetyl-L-carnitine的积分面积均数从正常鼠的80830893.2±14688120下降到76088592.1±7124082.7,p<0.01;
Azelnidipine的积分面积均数从正常鼠的857230.3±125275.7下降到560366.4±183125.3,p<0.001;
Cytarabine的积分面积均数从正常鼠的25652096.6±6572296.2下降到22709443.8±2330271.1,p<0.05;
Cytidine 5'-monophosphate(hydrate)的积分面积均数从正常鼠的6677870±1286108.5下降到5096042.5±1493492.0;p<0.05;
Cytosine的积分面积均数从正常鼠的30070366.4±6107532.8下降到22781514.4±8831677.4;p<0.001;
N-Acetyl-D-galactosamine 4-sulfate的积分面积均数从正常鼠的1244567.9±240259.7下降到961032.2±154902.3;p<0.05;
Uracil的积分面积均数从正常鼠的4052967.8±837815.1下降到3361426.7±1105663.8;p<0.05;
4-Indolecarbaldehyde的积分面积均数从正常鼠的2783004.9±522536.7上升到4618384.9±447059.6,p<0.001;
Deoxyadenosine monophosphate的积分面积均数从正常鼠的2065619.8±863159.5上升到5454850.7±1241369.2,p<0.001;
L-Tryptophan的积分面积均数从正常鼠的27948400.4±6023854.6上升到40916209.2±4198142.2,p<0.001;
L-Glutathione oxidized的积分面积均数从正常鼠的23877892.8±23631027上升到55890783.9±18901060.3;p<0.05;
N(6)-Methyladenosine的积分面积均数从正常鼠的1418739.8±376657.3上升到1768678.7±322331.1;p<0.05;
N-Acetyl-L-glutamic acid的积分面积均数从正常鼠的530155.5±213737.4上升到1526306.7±369684.7;p<0.001;
Uric acid的积分面积均数从正常鼠的7654224.6±2633236.6上升到16682826.5±6246385.1;p<0.05;
Xanthosine的积分面积均数从正常鼠的1228613.3±227431上升到2004903.7±435123.4;p<0.001。
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