[发明专利]一种具有抗肿瘤作用的药物组合物

说明书

本发明公开了一种以壳寡糖和盐酸阿霉素为活性成分的药物组合物。采用将壳寡糖与受试细胞孵育一定时间后再给予盐酸阿霉素的给药方式，可显著降低达到同等肿瘤细胞抑制率的盐酸阿霉素单独用药浓度。该药物组合物在MDA‑MB‑231人乳腺癌细胞，PATU‑8988人胰腺癌细胞，HepG2人肝癌细胞上具有良好的抗肿瘤作用。其制备方法简单，成本低廉，易于在各种药物剂型中应用推广。

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及一种壳寡糖作为药用辅剂的抗肿瘤用途。

背景技术

盐酸阿霉素(Doxorubicin Hydrochloride)是一种广谱抗肿瘤药物，可作用于细胞周期各个时期而诱导细胞凋亡。使用盐酸阿霉素的弊端是其具有强烈的细胞毒性，易致使正常细胞死伤，长期使用还会引发耐药性。因此，临床上常与其他药物联合使用。

壳寡糖(chitosan oligosaccharides)是由来源于虾蟹壳的壳聚糖降解得到的小分子寡糖，聚合度2～10。其具有良好的水溶性，易被分散吸收，还具有广泛生物活性，如抗氧化、抑菌、神经保护、抗凝血、抗肿瘤、降血脂等。壳寡糖作为自然界中唯一带阳离子的天然糖类，不仅可直接通过静电作用靶向改变肿瘤细胞膜通透性，且对正常细胞无毒性作用。也能通过增强免疫系统功能，间接起到抗肿瘤作用。

由此，我们设计开发一种含有壳寡糖与盐酸阿霉素的药物组合物，减少单独使用盐酸阿霉素的剂量，减轻其副作用，并改善抗肿瘤效果。

发明内容

本发明目的在于提供一种壳寡糖辅助抗肿瘤的药物组合物及其给药方案，开拓壳寡糖作为功能糖的延伸活性，为医学、食品科学等领域开发天然抗肿瘤制剂提供新资源。为实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：

一种以壳寡糖与盐酸阿霉素为活性成分的抗肿瘤组合物，作用于不同肿瘤细胞。以壳寡糖与受试细胞孵育一定时间后再给药盐酸阿霉素，优选时间为0.5～18h。壳寡糖浓度优选范围2～128μg/mL。

该发明的优点在于显著降低肿瘤细胞生存率，与单独给药半数致死量的盐酸阿霉素组相比，肿瘤细胞生存率降低20～30％，并减少对正常细胞的伤害。

附图说明

图1为壳寡糖对正常细胞的生存率曲线。受试细胞为MRC-5

图2为优化壳寡糖浓度及其与受试细胞孵育时间的细胞生存率曲线。受试细胞为MDA-MB-231

具体实施方式

通过以下具体实施方式对实现对本发明的进一步说明。

实施例1壳寡糖对正常细胞生存率影响

选用人胚肺成纤维细胞MRC-5，给与不同浓度壳寡糖24、48、72h，由图1可知，细胞生存率随作用时间延长无显著性差异，说明壳寡糖未抑制正常细胞生存率。

实验过程：接种细胞：细胞生长至90％，进行细胞传代操作，用完全培养基将消化完全的细胞配成单细胞悬液，以5×10³个/mL的密度铺板至96孔板，每孔200μL，为防止溶液挥发，边缘孔每孔加150μL DPBS，组别设定为空白组及药物组，每组3个复孔。

培养细胞：将96孔板放入37℃、5％CO₂细胞培养箱中贴壁培养24h。

给药：药物组每孔加入含有不同浓度壳寡糖，每孔100μL，对照组每孔加100μL完全培养基，放入培养箱中孵育24、48、72h。

检测：吸取原液，每孔加100μL CCK-8与完全培养基1:10稀释的混合液，孵育1-2h后检测450nm处吸光值。

通过公式计算细胞存活率(％)＝(药物组OD值－空白组OD值)/(对照组OD值－空白组OD值)×100％。

实施例2给药方式考察