[发明专利]纳米抗体I22在重组人干扰素α2b检测中的应用

权利要求书

1.纳米抗体I22在重组人干扰素α2b检测中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：采用纳米抗体I22与胶体金试纸条结合方式对重组人干扰素α2b实现快速检测。

3.权利要求1或2所述应用的纳米抗体I22标记胶体金试纸条，其特征在于：由以下制备方法获得：

第一步，进行标记蛋白，用10mM的磷酸钾缓冲液在低温下透析蛋白两个小时；

第二步，将1.5mL离心管用超纯水清洗两遍，吸取1mL胶体金缓慢加入管中，向管中加入10μL的0.2M碳酸钾后上下震荡混合，通过磁力搅拌，逐滴加入总量为20μg的纳米抗体I22，混匀后反应40min；

第三步，加入90μL的8％BSA，进行封闭反应40min；

第四步，在14000rpm/min转速下低温离心35min，去掉上清液，用含1％BSA的PBS液洗涤重复此步骤6-8次，保留沉淀；

第五步，用600μL金复溶液将沉淀复溶后铺在7mm×160mm的金垫上进行干燥；

第六步，用PBS稀释液稀释重组人干扰素α2b标准品至浓度为2mg/mL，包被10μL的量；将包被His标签的抗体用PBS稀释液稀释至浓度为1mg/mL，包被10μL的量；进行包被NC膜；

第七步，在室温低湿度条件下进行干燥；

第八步，从底板上从上到下依次粘贴吸水纸、NC膜、金垫、样品层析垫，用斩切机切成3.6mm宽的试纸条用以检测使用；

第九部，对胶体金试纸条进行应用测试，得出胶体金试纸条的检测限为1μg/mL，能满足快速检测重组人干扰素α2b制品的要求。