[发明专利]一种仿刺参葡聚糖结合蛋白及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 201910329721.X 申请日: 2019-04-23
公开(公告)号: CN110066330B 公开(公告)日: 2020-06-09
发明(设计)人: 孔令明;雷一萱;丛海燕 申请(专利权)人: 山东大学
主分类号: C07K14/435 分类号: C07K14/435;C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;A23K20/147;A61K38/17;A61P31/04
代理公司: 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 代理人: 郑平
地址: 264209 山东*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 刺参 聚糖 结合 蛋白 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种仿刺参葡聚糖结合蛋白,其特征在于,所述仿刺参葡聚糖结合蛋白AJ-GBP的氨基酸序列为SEQ ID NO.1。

2.编码权利要求1所述的仿刺参葡聚糖结合蛋白的氨基酸序列的DNA分子。

3.如权利要求2所述的DNA分子,其特征在于,所述DNA分子为如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

4.含有权利要求2或3所述的DNA分子的重组表达载体或转基因细胞系统。

5.含有权利要求2或3所述的DNA分子的转基因重组菌。

6.如权利要求4所述的重组表达载体,其特征在于,将所述的DNA分子插入到大肠杆菌表达载体中得到的表达仿刺参葡聚糖结合蛋白AJ-GBP的重组表达载体,其中,所述大肠杆菌表达载体为pEASY-E2。

7.如权利要求5所述的转基因重组菌,其特征在于,所述转基因重组菌是将重组表达载体导入大肠杆菌中筛选得到。

8.权利要求2所述的DNA分子在制备仿刺参葡聚糖结合蛋白AJ-GBP中的应用。

9.权利要求4所述的重组表达载体在制备仿刺参葡聚糖结合蛋白AJ-GBP中的应用。

10.权利要求4所述的转基因细胞系统在制备仿刺参葡聚糖结合蛋白AJ-GBP中的应用。

11.权利要求5所述的转基因重组菌在制备仿刺参葡聚糖结合蛋白AJ-GBP中的应用。

12.一种权利要求1所述的葡聚糖结合蛋白的制备方法,其特征在于,制备方法如下:

以仿刺参cDNA为模板,用引物F1和R1进行PCR扩增;

PCR产物经纯化后与大肠杆菌载体pEASY-E2载体进行连接,连接产物转化大肠杆菌,测序鉴定重组子;

将表达载体pEASY-AJ-GBP转入Trans BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞,筛选转化子,将转化子接种于含有氨苄青霉素的LB培养基中,用IPTG诱导表达,而后用超滤管纯化重组蛋白,即得葡聚糖结合蛋白AJ-GBP;

其中,所述引物分别为:F1:5’-ATGACCGCCGGTGGTGGAGG-3’;R1:5’-GCACCAGGATCGACGCTCAAG-3’。

13.权利要求1所述的仿刺参葡聚糖结合蛋白的应用,其特征在于,所述仿刺参葡聚糖结合蛋白AJ-GBP用于制备广谱抗菌类制剂或饲料添加剂。

14.权利要求1所述的仿刺参葡聚糖结合蛋白的应用,其特征在于,所述仿刺参葡聚糖结合蛋白AJ-GBP用于制备抗枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、藤黄短小杆菌和鳗弧菌的药物制剂或饲料添加剂。

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